[发明专利]一种鱼类疫苗的制备方法在审
| 申请号: | 201510314655.0 | 申请日: | 2015-06-10 | 
| 公开(公告)号: | CN104922662A | 公开(公告)日: | 2015-09-23 | 
| 发明(设计)人: | 谢宇;王健鹏 | 申请(专利权)人: | 山东安特生物技术有限公司 | 
| 主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61K47/36 | 
| 代理公司: | 江西省专利事务所 36100 | 代理人: | 杨志宇 | 
| 地址: | 264200 山东省威海市高区*** | 国省代码: | 山东;37 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 鱼类 疫苗 制备 方法 | ||
1.一种鱼类疫苗的制备方法,包括如下步骤:
(1)取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml进行溶解,再加水稀释至500ml,制得pH=6.0的乙酸/乙酸钠缓冲液;
(2)用步骤(1)制得的乙酸/乙酸钠缓冲液作为溶剂溶解壳聚糖,制得浓度为2mg/ml的壳聚糖溶液;再向2mg/ml的壳聚糖溶液中加入Tween80,使得壳聚糖溶液中Tween80的质量分数为1﹪;
(3)取3ml鱼类疫苗药液与3ml浓度为50mmol/L的硫酸钠溶液混匀,加入到10ml步骤(2)制得的壳聚糖溶液中,边加边搅拌,搅拌速度为800r/min,再向其中逐滴滴加2mg/ml的三聚磷酸钠溶液5ml,溶液变成乳光悬液,继续搅拌10min,进行超声分散,得到分散液;
(4)将步骤(3)得到的分散液再以10000r/min的转速高速离心20min,取离心后的沉淀用蒸馏水进行洗涤,再向洗涤后的沉淀中加入NaCl和蒸馏水,使NaCl的质量分数为0.9%,即得。
2.一种鱼类疫苗的制备方法,包括如下步骤:
(1)取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml进行溶解,再加水稀释至500ml,制得pH=6.0的乙酸/乙酸钠缓冲液;
(2)用步骤(1)制得的乙酸/乙酸钠缓冲液作为溶剂溶解壳聚糖,制得浓度为2mg/ml的壳聚糖溶液;再向2mg/ml的壳聚糖溶液中加入Tween80,使得壳聚糖溶液中Tween80的质量分数为0.5-1.5﹪;
(3)取3ml鱼类疫苗药液与2-5 ml浓度为50mmol/L的硫酸钠溶液混匀,加入到8-12 ml步骤(2)制得的壳聚糖溶液中,边加边搅拌,搅拌速度为800r/min,再向其中逐滴滴加2mg/ml的三聚磷酸钠溶液3-8ml,溶液变成乳光悬液,再向其中逐滴滴加复合醇0.3-0.6ml,继续搅拌8-15min,进行超声分散,得到分散液;
(4)将步骤(3)得到的分散液再以10000r/min的转速高速离心20min,取离心后的沉淀用蒸馏水进行洗涤,再向洗涤后的沉淀中加入NaCl和蒸馏水,使NaCl的质量分数为0.9%,即得;
所述的复合醇中各原料体积比为乙醇:1,2-丙二醇=1:5-8。
3.如权利要求2所述的一种鱼类疫苗的制备方法,包括如下步骤:
(1)取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml进行溶解,再加水稀释至500ml,制得pH=6.0的乙酸/乙酸钠缓冲液;
(2)用步骤(1)制得的乙酸/乙酸钠缓冲液作为溶剂溶解壳聚糖,制得浓度为2mg/ml的壳聚糖溶液;再向2mg/ml的壳聚糖溶液中加入Tween80,使得壳聚糖溶液中Tween80的质量分数为1﹪;
(3)取3ml鱼类疫苗药液与3ml浓度为50mmol/L的硫酸钠溶液混匀,加入到10ml步骤(2)制得的壳聚糖溶液中,边加边搅拌,搅拌速度为800r/min,再向其中逐滴滴加2mg/ml的三聚磷酸钠溶液5ml,溶液变成乳光悬液,再向其中逐滴滴加复合醇0.5ml,继续搅拌10min,进行超声分散,得到分散液;
(4)将步骤(3)得到的分散液再以10000r/min的转速高速离心20min,取离心后的沉淀用蒸馏水进行洗涤,再向洗涤后的沉淀中加入NaCl和蒸馏水,使NaCl的质量分数为0.9%,即得;
所述的复合醇中各原料体积比为乙醇:1,2-丙二醇=1:6。
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