[发明专利]山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药材及其制剂的质量控制方法，具体涉及山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法。

背景技术

山茱萸为山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果肉，在中医临床应用广泛，具有补益肝肾，收涩固脱之功，常用于眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、遗尿尿频、崩漏带下、大汗虚脱、内热消渴等症。现代研究显示，山茱萸所含化学成分较为复杂，主要含有环烯醚萜苷类、三萜酸类、黄酮类、有机酸及其酯类、多糖类等。其中，环烯醚萜苷类化学成分具有降低血糖、增强免疫、利尿、降压、抗炎、神经保护等生物活性，三萜酸类化学成分具有增强免疫、保肝、降血糖、抗肿瘤等生物活性，二者均为山茱萸药材发挥传统功效的主要物质基础。目前文献报道有关山茱萸药材的质量控制方法多以环烯醚萜苷类或有机酸类化学成分作为主要评价指标，而《中国药典》2010年版仅收载以马钱苷单一成分作为山茱萸药材的含量测定指标，难以全面、客观地用于评价山茱萸药材及其提取物与制剂的品质。目前尚未见同时以环烯醚萜苷类和三萜酸类活性成分为质控指标的多指标测定方法用于全面有效控制山茱萸药材质量的报道。

发明内容

发明目的：本发明的目的是为了克服现有技术的不足，分别采用HPLC-UV、HPLC-ELSD方法建立用于测定山茱萸药材中莫诺苷、马钱苷、当药苷三种环烯醚萜苷类和齐墩果酸、熊果酸两种三萜酸类化学成分含量的质量控制方法，以期通过同时控制两类活性成分的含量达到对山茱萸药材及其提取物与制剂质量的有效控制，以实现山茱萸系列产品质量标准的提升，为客观评价山茱萸系列产品品质提供技术支撑，对控制山茱萸相关产品质量和保证疗效具有重要意义。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法，包括以下步骤：

(1)采用HPLC-UV法测定山茱萸药材及其提取物与制剂中莫诺苷、马钱苷、当药苷3种环烯醚萜苷类化学成分的含量；

(2)采用HPLC-ELSD法测定山茱萸药材及其提取物与制剂中乌苏酸、齐墩果酸2种三萜酸类化学成分的含量；

(3)分别以步骤(1)所测得环烯醚萜类成分总量、步骤(2)所测得三萜酸类成分总量，或者步骤(1)及步骤(2)所测定得环烯醚萜类和三萜酸类成分总量作为评价指标用于制定评价山茱萸药材及其提取物与制剂品质及进行质量控制的标准。

作为优选方案，以上所述的山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法，步骤(1)所述的HPLC-UV测定的步骤为：

(1)供试品溶液的制备

取山茱萸药材或其提取物或制剂适量，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积浓度为40％～80％甲醇，密塞，称定重量，提取60～120min，再称定重量，加体积浓度40％～80％甲醇补足减失的重量，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过后，取续滤液，即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备

取莫诺苷、马钱苷、当药苷对照品各适量，加体积浓度40％～80％甲醇制成分别含莫诺苷50μg·mL^-1、马钱苷50μg·mL^-1、当药苷20μg·mL^-1的混合对照品溶液；

(3)样品中环烯醚萜苷类活性组分的测定

取步骤(1)制备得到的供试品溶液、步骤(2)制备得到的混合对照品溶液分别注入高效液相色谱仪进行测定，获得色谱图，按外标一点法分别计算莫诺苷、马钱苷、当药苷的质量浓度；

以上所述的高效液相色谱测定的条件为：

色谱柱：反相C18色谱柱；

流动相：以乙腈为A相，体积浓度0.1％甲酸水溶液为B相，梯度洗脱；

流速：0.8mL/min～1mL/min；

检测波长：235～245nm。

作为优选方案，以上所述的山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法，步骤(2)所述的HPLC-ELSD测定的步骤为：

(1)供试品溶液的制备

取山茱萸药材或其提取物或制剂适量，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积浓度为60％～100％甲醇或乙醇，密塞，称定重量，提取60～120min，再称定重量，加体积浓度为60％～100％甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过后，取续滤液，即得。

(2)对照品溶液的制备