[发明专利]金线莲的组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物栽培技术领域，尤其是涉及一种金线莲的组培快繁方法。

背景技术

金线莲为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药，又名金线兰、金丝草。主要种植于我国福建、台湾、广东、广西等亚热带及热带地区，素有“金草”、“神药”等美称。金线莲喜欢生长在潮湿、阴凉的环境中，温度需要控制在20～28℃之间，光照要求不高，最忌阳光直射，对环境的要求比较严格。

近年来，由于其药用价值不断被发掘，为满足市场的需求，金线莲的人工繁殖及培养技术被大量研究及应用。在种子繁殖、扦插繁殖和组培繁殖中，组培繁殖是最适合金线莲人工培育的繁殖方法，组培繁殖技术是实现金线莲规模化、产业化培育和生产的最优技术。

中国专利CN102090341A公开一种金线莲的快繁方法，包括种苗消毒、芽诱导、芽增殖、幼苗培养、根诱导、试管苗移栽，所述芽增殖的培养基为去除肌醇的MS+ZnSO₄·7H₂O6mg/L+KH₂PO₄180mg/L+6-BA4mg/L+NAA1mg/L+2％蔗糖。

发明内容

本发明的发明目的在于：针对上述存在的问题，提供一种能够快速促进金线莲茎段的繁殖并生长的一种金线莲的组培繁殖方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

金线莲的组培快繁方法，是以金线莲植体除叶片外的全株植物作为外植体，将外植体消毒后分别进行诱导培养、增殖培养、生根培养的方法；所述诱导培养是将消毒后的外植体放在灭过菌的诱导培养基上，诱导培养28-32天；所述诱导培养基的组分为：MS+BA1.0-1.5mg/L+香蕉汁80-120g/L+NAA0.5-0.8mg/L,pH值为5.5-5.8；培养环境温度(23±2)℃，前一周为黑暗培养，后期改为光照强度为1500～2000lx，光照时数10h/d。

本发明中，所述金线莲为野生金线莲。

进一步地，所述外植体的消毒方法为：将带芽的金线莲茎段剪成2-3cm长的茎段用自来水冲洗，置饱和漂白粉上清液中浸泡15min，并用毛刷轻轻刷洗，冲洗干净；在自来水下滴冲1-2h，双蒸水冲洗2-3次，置超净工作台用75％酒精消毒30s，0.1％氯化汞溶液消毒10-13min，无菌水冲洗3-5次。

进一步地，所述增殖培养的方法为：将诱导的茎段长出的芽体转移到增殖培养基中培养28-32天至丛生芽长至1.5-3.0cm高，增殖培养基的组分为：1/2MS+BA1.6-2.0mg/L+NAA0.2-0.4mg/L+香蕉汁100-120g/L+AC0.2-0.3％,pH值为5.5-5.8；培养环境温度(23±2)℃，前一周为黑暗培养，后期改为光照强度为1500-2000lx，光照时数10h/d。

进一步地，所述生根培养的方法为：当丛生芽长至1.5-3.0cm高，2-3片叶时，将幼苗分成单个植株，接入不同的生根培养基中诱导生根，每种培养基接种40-50株，培养28-32天，所述生根培养基的配方为1/2MS+BA 0.8-1.2mg/L+NAA0.2-0.4mg/L+AC0.2-0.3％，pH值为5.5-5.8；培养环境温度(23±2)℃，前一周为黑暗培养，后期改为光照强度为1500～2000lx，光照时数10h/d。

综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：本发明以金线莲植体除叶片外的全株植物作为外植体，在诱导培养、增殖培养、生根培养等步骤中采用了适于金线莲各个成长阶段的组培培养基，使得金线莲出牙率高，不定芽增殖率高，增殖速度快，最终移植时成活率高。本发明中育苗基质所用的原材料来源广泛，应用成本低；有利于金线莲工厂化、规模化、集约化生产。

具体实施方式

本发明公开了一种能够快速促进金线莲茎段的繁殖并生长的一种金线莲的组培繁殖方法，使得金线莲出牙率高，不定芽增殖率高，增殖速度快，最终移植时成活率高。以下通过具体实施例对本发明作进一步详述。

实施例1

选取除去金线莲叶片后的野生金线莲茎段作为外植体，对外植体的消毒后，分别进行诱导培养、增殖培养、生根培养。

对外植体的消毒的操作方法为：将带芽的金线莲茎段剪成2-3cm长的茎段用自来水冲洗，置饱和漂白粉上清液中浸泡15min，并用毛刷轻轻刷洗，冲洗干净；在自来水下滴冲1h，双蒸水冲洗2次，置超净工作台用75％酒精消毒30s，0.1％氯化汞溶液消毒10min，无菌水冲洗5次。