[发明专利]一种球虫佐剂及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及免疫技术领域，具体的涉及一种球虫佐剂及其应用。

背景技术

佐剂不仅是弱毒疫苗的重要组成成分，对增强灭活疫苗与新型基因工程疫苗的免疫效果亦发挥着不可替代的作用。

随着人们对免疫反应尤其是先天性免疫的认识的加深，佐剂研究已从凭经验反复试验转向更为理性。如弗氏完全佐剂(CFA)含有灭活的分枝杆菌(卡介苗)成份，是典型的促进机体产生体液免疫和细胞免疫应答的佐剂，可诱导产生Th1型细胞因子，促进IgG的产生，抑制IgM的产生，从而抑制免疫耐受的产生，推迟超敏反应，增加移植排斥，促进抗肿瘤作用。MPL(单磷酸脂质A)是沙门氏菌(Salmonella Minnesote)LPS的衍生物，可激活TLR4受体，诱导Th1型细胞免疫应答，并且可以活化CTLs细胞。由MPL和铝构成的AS04佐剂已经被批准用于人HPV和HBV疫苗中。相比于铝佐剂，AS04能够诱导产生更早和更长久的体液免疫应答。目前还有很多Toll样受体激动剂被开发成佐剂，包括poly(I:C)、GLA、鞭毛蛋白、鸟苷类似物、CpG DNA等。

球虫含有6000余种蛋白质、多种脂类和糖类等大分子物质，其抗原组分是弗氏佐剂中卡介苗组分的几十倍，相比于细菌，球虫具有激发机体更多模式识别受体(PRRs)的潜能。有研究表明球虫可以通过调节先天性免疫和适应性免疫应答，增强机体对其他病原微生物的免疫应答。而且球虫的宿主具有专一性，不会跨种间传播，因而其生物安全性较高。

因此有必要开发一种基于球虫复杂的抗原组分的佐剂，从而为提升疫苗的免疫效果提供新的途径。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可以诱导机体产生更有效的保护性体液免疫和细胞免疫应答的免疫佐剂。

为达到以上目的，本发明提供了一种球虫佐剂，所述球虫佐剂包括顶复门真球虫目原虫和/或其提取物。

可选的，所述顶复门真球虫目原虫选自艾美耳球虫、弓形虫、隐孢子虫和疟原虫中的至少一种。

可选的，所述提取物为顶复门球虫卵囊提取物。

可选的，所述提取物选自顶复门球虫的DNA、RNA、脂类、糖类及蛋白质中的至少一种。

本发明还提供了所述球虫佐剂在制备针对病原体的疫苗中的应用。

可选的，所述疫苗为禽用疫苗、至少两种禽用疫苗的联苗、牛用疫苗、至少两种牛用疫苗的联苗、猪用疫苗、至少两种猪用疫苗的联苗、羊用疫苗、至少两种羊用疫苗的联苗、人用疫苗或至少两种人用疫苗的联苗。

可选的，所述禽用疫苗包括禽流感酶活疫苗、鸡新城疫灭活疫苗、鸡减蛋综合症灭活疫苗和鸡传染性法氏囊活疫苗；

所述猪用疫苗包括猪蓝耳病弱毒活疫苗、猪口蹄疫灭活疫苗、猪伪狂犬灭活疫苗、猪喘气病弱毒菌苗、猪链球菌双价灭活菌苗、副猪嗜血杆菌灭活疫苗、牛传染性鼻气管炎灭活疫苗、支原体灭活疫苗；

所述牛用疫苗包括牛口蹄疫O型灭活疫苗、牛传染性胸膜肺炎弱毒苗、牛巴氏杆菌病油乳剂疫苗、牛传染性鼻气管炎弱毒疫苗、牛沙门氏菌灭活苗；

所述羊用疫苗包括羔羊大肠杆菌疫苗、羔羊大肠杆菌疫苗、氢氧化铝菌羔羊痢疾苗、羊痘鸡胚化弱毒疫苗、Ⅱ号炭疽菌苗、口疮弱毒细胞冻干苗；

所述人用疫苗包括乙肝疫苗、卡介苗、麻疹疫苗、脊髓灰质炎疫苗。

本发明还提供了所述球虫佐剂在制备抗肿瘤疫苗中的应用。

本发明还提供了所述球虫佐剂在制备免疫调节复合物中的应用。

相比于传统的油乳佐剂，本发明的球虫佐剂具有严格的宿主特异性(对非宿主动物的安全性)及激发宿主免疫应答的有效性，可以使疫苗产生的免疫效果提高两个抗体滴度，而且能够诱导对预防病毒及其它胞内病原体感染更为有效的Th1型和CTL型细胞免疫应答。

附图说明

图1为本发明球虫佐剂用于鸡重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(Re-4株+Re-6株)后对禽流感病毒H5亚型Re-4株及Re-6株血凝抑制抗体效价的测试结果。

图2为本发明球虫佐剂用于鸡新支流三联灭活疫苗后,血清中ND、H9血凝抑制抗体效价的测试结果。

图3为本发明球虫佐剂添加于鸡新支流三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+H9WD株)后，同时滴鼻免疫鸡传染性法氏囊病活疫苗(Gumboro D78)检测其对传染性法氏囊病活疫苗的免疫增强效果。

图4为本发明球虫佐剂用于鸡新支减流四联灭活疫苗免疫蛋鸡后产生的针对ND、IB、EDS及H9抗体效价的测试结果。