[发明专利]检测JAK2基因V617F位点多态性的引物、试剂盒及其PCR方法

权利要求书

1.一种检测JAK2基因V617F位点多态性的引物及探针，其特征在于，所述引物包括：野生型特异性上游引物、突变型特异性上游引物和野生型特异性上游引物与突变型特异性上游引物共用的下游引物；

且所述野生型特异性上游引物序列如SEQ No.17所示，所述突变型特异性上游引物序列如SEQ No.14所示，所述共用的下游引物序列如SEQ No.16所示；

所述探针为Taqman探针，序列如SEQ No.15所示。

2.一种检测JAK2基因V617F位点多态性的试剂，其特征在于：所述试剂含有权利要求1所述的引物及探针。

3.一种检测JAK2基因V617F位点多态性的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒含有权利要求1所述的引物及探针。

4.按照权利要求3所述检测JAK2基因V617F位点多态性的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括PCR反应管、dNTPs和Taq酶混合液、PCR缓冲液、检测管家基因GAPDH的上游引物、检测管家基因GAPDH的下游引物、检测管家基因GAPDH的探针、阳性质控品和空白对照；

所述检测管家基因GAPDH的上游引物序列如SEQ No.19所示；所述检测管家基因GAPDH的下游引物序列如SEQ No.20所示；所述检测管家基因GAPDH的探针序列如SEQ No.21所示。

5.按照权利要求4所述检测JAK2基因V617F位点多态性的试剂盒，其特征在于：所述突变型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物、所述检测管家基因GAPDH的探针被预先包被于T型PCR反应管内；以及与所述野生型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物、所述检测管家基因GAPDH的探针被预先包被于G型PCR反应管内。

6.按照权利要求5所述检测JAK2基因V617F位点多态性的试剂盒，其特征在于：所述T型PCR反应管内突变型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物、所述检测管家基因GAPDH的探针浓度分别为50nM-2μm、50nM-2μm、50nM-400nM、1pm-20pm、1pm-20pm、0.05pm-5pm；以及所述G型PCR反应管内野生型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物、所述检测管家基因GAPDH的探针浓度分别为50nM-2μm、50nM-2μm、 50nM-400nM、1pm-20pm、1pm-20pm、0.05pm-5pm。

7.按照权利要求6所述检测JAK2基因V617F位点多态性的试剂盒，其特征在于：所述T型PCR反应管内突变型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物、所述检测管家基因GAPDH的探针浓度分别为500nM、500nM、100nM、5pm、5pm、2.5pm；以及所述G型PCR反应管内野生型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物、所述检测管家基因GAPDH的探针浓度分别为500nM、500nM、100nM、5pm、5pm、2.5pm。