[发明专利]一种从野百合萃取野百合碱的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种从野百合萃取野百合碱的方法。

背景技术

野百合碱，CAS号 315-22-0，分子式 C16H23NO6，分子量325.36，分子结构：

     野百合碱对小鼠肉瘤-180、白血病L615、大鼠瓦克癌-256等均有一定的抑制作用（接种后24小时开始治疗），其中以对瓦克癌-256疗效最为显著。另有报告，对S37抑制率为54～75%。如在野百合碱母核氮原子上引入氧原子，毒性可降低，但对肉瘤-180的抑制率亦随之降低。临床试用于皮肤癌及子宫癌有较好的疗效，对白血病亦有一定效果。此生物碱为双稠吡咯啶类，其抗癌作用与烷化剂相似。通过文献检索，从野百合中制备野百合碱的方法披露较少，多采用硅胶柱分离，操作复杂，生产成本高。现有野百合碱的制备方法一般采用常压提取，再采用硅胶柱或制备液相方法分离，常压提取法存在提取效率低，后续纯化工序操作复杂等缺点。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺陷和不足，提供一种从野百合萃取野百合碱的高效方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种从野百合萃取野百合碱的方法，其特征在于以下步骤：

1）野百合原料粉碎20-80目，投入萃取釜，通入液态CO2和夹带剂，在压力20-30MPa、温度40-55℃条件下，萃取30-60min，在压力5-9MPa、温度40-60℃条件下解析，得萃取物；

2）上述萃取物用酸水溶解，用纳滤膜过滤，滤液再用反渗透膜浓缩，浓缩液加乙醇溶液沉淀，滤出得沉淀物用丙酮溶液溶解重结晶2-3次，干燥即得野百合碱。

步骤1）中所述的夹带剂为氯仿溶液，流速为0.1-0.5ml/g/min。

步骤2）中所述的纳滤膜为截留分子量500-1000的中空纤维素纳滤膜。

本发明的优点是：方法利用超临界CO2萃取，提取效率高，溶出杂质少，而且对环境友好；方法采用膜分离技术，是一种物理分离过程，操作简单，而且环保、低能耗。

具体实施方式

   下面将结合具体实施方式进一步说明本发明。

实施例1：

野百合粉碎40目，称取3kg投入萃取釜，通入液态CO2，流速为3ml/g/min调节压力20MPa、温度50℃，达到上述参数，再通入氯仿溶液，流速为0.2ml/g/min，萃取40min，在压力6MPa、温度50℃条件下解析萃取物。所得萃取物用1%的盐酸水溶液溶解，用截留分子量500的中空纤维素膜纳滤，滤液再用反渗透膜浓缩，浓缩液加3倍体积乙醇溶液沉淀12小时，滤出得沉淀物用丙酮溶液溶解重结晶2次，干燥得野百合碱1.4g，经HPLC检测，含量98.2%。

实施例2：

野百合粉碎60目，称取3kg投入萃取釜，通入液态CO2，流速为5ml/g/min调节压力25MPa、温度40℃，达到上述参数，再通入氯仿溶液，流速为0.2ml/g/min，萃取30min，在压力9MPa、温度60℃条件下解析萃取物。所得萃取物用22%的盐酸水溶液溶解，用截留分子量800的中空纤维素膜纳滤，滤液再用反渗透膜浓缩，浓缩液加4倍体积乙醇溶液沉淀8小时，滤出得沉淀物用丙酮溶液溶解重结晶3次，干燥得野百合碱1.1g，经HPLC检测，含量98.5%。

实施例3：

野百合粉碎80目，称取3kg投入萃取釜，通入液态CO2，流速为2ml/g/min调节压力30MPa、温度45℃，达到上述参数，再通入氯仿溶液，流速为0.2ml/g/min，萃取60min，在压力5MPa、温度40℃条件下解析萃取物。所得萃取物用1%的盐酸水溶液溶解，用截留分子量1000的中空纤维素膜纳滤，滤液再用反渗透膜浓缩，浓缩液加3倍体积乙醇溶液沉淀10小时，滤出得沉淀物用丙酮溶液溶解重结晶3次，干燥得野百合碱1.6g，经HPLC检测，含量97.1%。