[发明专利]一种木通酸的制备方法

说明书

技术领域

本发明公开了一种木通酸的制备方法，属于生物技术领域。

背景技术

木通酸是三萜类成分，分子式C₃₀H₃₂O₄，其结构为3α,24-二羟基-30-去甲齐墩果烷-12,20 (29 )-二烯-28-酸，木通酸为木通的专属性成分，具有抗炎活性。木通为木通科木通属植物，味苦，性微寒，具有清心火，利小便，通经下乳之功效。主治胸中烦热、喉痹咽痛，尿赤，五淋，水肿，周身挛痛，经闭乳少等症。现代药理研究表明，木通具有利尿、抗菌和抗肿瘤活性。

陶瓷膜又称无机陶瓷膜，是以无机陶瓷材料经特殊工艺制备而形成的非对称膜。陶瓷膜管壁密布微孔，在压力作用下，原料液在膜管内或膜外侧流动，小分子物质（或液体）透过膜，大分子物质（或固体）被膜截留，从而达到分离、浓缩、纯化和环保等目的。陶瓷膜具有分离效率高、效果稳定、化学稳定性好、耐酸碱、耐有机溶剂、耐菌、耐高温、抗污染、机械强度高、再生性能好、分离过程简单、能耗低、操作维护简便、使用寿命长等众多优势，已经成功应用于食品、饮料、植（药）物深加工、生物医药、发酵、精细化工等众多领域，可用于工艺过程中的分离、澄清、纯化、浓缩、除菌、除盐等。

通过文献检索，在现有专利中有关从木通中制备木通酸的方法，大多通过常规试剂提取和柱层析分离。该类方法所得产品纯度低，植物有效成分的提取率不高，不适合工业化生产。

发明内容

本发明的目的是为了补充现有木通酸制备方法的不足，提供一种对环境友好，提取效率高、生产成本低的制备方法。

为实现上述目的，木通酸的制备方法采用以下技术方案：

（1）原材料的处理：取木通经60~70℃干燥，粉碎，过20~80目筛；

（2）酶解：将上述粗粉放入pH值4~5、固液比为1：0.5~1的稀酸溶液中，并向其中加入粗粉重量0.1%~0.3%的生物酶，在温度为45~50℃的条件下酶解1~2h；

（3）微波提取：将步骤（2）中酶解混合物置于功率大小为1000~2000W的微波提取器中，加入料液比为1：2~5、70~80%的乙醇，进行醇提，得到木通酸粗提液；

（4）纯化：将上述木通酸粗提液首先在温度为20~40℃的条件下，用0.4微米的陶瓷膜分离出部分杂质；再将所得到的提取液上大孔吸附树脂柱，先用2~3倍柱体积的蒸馏水洗脱，再用2~4倍柱体积、40~60%的乙醇洗脱，最后用2~5倍柱体积、80~90%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液用0.1~0.5微米有机微孔滤膜过滤，通过HPLC外标法检测，收集富含木通酸的部分；

（5）真空浓缩、冷冻干燥：将上述富含木通酸的液体部分经70~80℃真空浓缩至固体含量为20～25％时，冷冻干燥得到木通酸产品。

步骤（2）所述生物酶为纤维素酶、果胶酶、半纤维素酶中的一种。

步骤（3）中所述微波提取在温度为60~90℃的条件下提取300~900s。

步骤（4）中所述大孔吸附树脂为X-5、LSA-21、WLD中的一种。

本发明采用生物酶酶解辅助微波提取法来制备木通酸具有很多优点，其中生物酶在酸性环境中可以破坏植物细胞壁，使得植物的有效成分充分流出，从而大大提高了木通酸的提取率，另外微波提取法具有选择性好、设备简单、操作简便等优点；同时产品纯化时应用陶瓷膜和大孔吸附树脂可以大大提高所得产品的纯度，其中陶瓷膜具有分离效率高、效果稳定、化学稳定性好、耐酸碱、耐有机溶剂、耐菌、耐高温、抗污染、机械强度高、再生性能好、分离过程简单、能耗低、操作维护简便、使用寿命长等众多优势。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：