[发明专利]胃肠外诺如病毒疫苗配制剂

说明书

本申请是申请日为2012年07月11日、中国申请号为201280043691.2、发明名称为“胃肠外诺如病毒疫苗配制剂”的发明申请的分案申请。

对相关申请的交叉引用

本申请要求2011年7月11日提交的美国临时专利申请61/506,447的优先权，其全部内容通过提及并入本文。

发明领域

本发明属于疫苗，特别是诺如病毒疫苗领域。另外，本发明涉及制备疫苗组合物的方法及诱导和评估人中针对诺如病毒的保护性免疫应答的方法。

发明背景

诺如病毒是不可培养的人类杯状病毒，已经成为非细菌性胃肠炎的流行性爆发的单一最重要起因(Glass等,2000；Hardy等,1999)。在灵敏的分子诊断测定法的开发之前，对诺如病毒的临床意义的重视不够。原型基因小组I(genogroupI)诺沃克病毒(NV)基因组的克隆和自重组杆状病毒表达系统生成病毒样颗粒(VLP)引起了测定法的开发，其揭示了分布广泛的诺如病毒感染(Jiang等1990；1992)。

诺如病毒是单链、正义RNA病毒，含有不分段的RNA基因组。病毒基因组编码三个可读框，其中后两个分别规定主要衣壳蛋白和次要结构蛋白的生成(Glass等2000)。当在真核表达系统中以高水平表达时，NV和某些其它诺如病毒的衣壳蛋白自组装成在结构上模拟天然诺如病毒病毒体(virion)的VLP。当通过透射电子显微术观看时，VLP在形态上与自人粪样品分离的感染性病毒体不可区分。

针对诺如病毒的免疫应答是复杂的，而且现在正在阐明保护的关联(correlate)。用天然病毒实施的人志愿者研究证明了粘膜衍生的记忆免疫应答提供免于感染的短期保护并提示疫苗介导的保护是可行的(Lindesmith等2003；Parrino等1997；Wyatt等,1974)。

虽然由于VLP的可得性和它们被大量生成的能力，诺如病毒不能在体外培养，但是在定义诺如病毒衣壳的抗原拓扑学和结构拓扑学方面已经取得了可观的进步。VLP保留病毒衣壳蛋白的真实构象(authenticconfirmation)，但是缺乏感染性遗传物质。结果，VLP模拟病毒与细胞受体的功能相互作用，由此引发适宜的宿主免疫应答，但是缺乏繁殖或引起感染的能力。与NIH联合，贝勒医学院(BaylorCollegeofMedicine)在学术性的、调查人发起的I期临床试验中研究了人志愿者中针对NVVLP的体液、粘膜和细胞免疫应答。口服施用VLP在健康成人中是安全的且有免疫原性的(Ball等1999；Tacket等2003)。但是，需要相对大量的多剂VLP以观察免疫应答。在其它学术中心，在动物模型中进行的临床前实验已经证明了当与细菌外毒素佐剂一起鼻内施用时针对VLP的免疫应答的增强(Guerrero等2001；Nicollier-Jamot等2004；Periwal等2003；Souza等(2007)VaccineVol.25(50):8448-59)。然而，人中针对诺如病毒的保护性免疫仍然难以捉摸，因为人中保护性免疫应答的指标仍然尚未清楚鉴定(Herbst-Kralovetz等(2010)ExpertRev.Vaccines9(3),299–307)。

发明概述

本发明部分基于如下的发现，即单剂诺如病毒疫苗在胃肠外施用时在人中引发快速的、强力的针对诺如病毒的保护性免疫应答。因而，本发明提供了一种在人中引发针对诺如病毒的保护性免疫的方法，其包括对所述人胃肠外施用不超过单剂疫苗组合物，所述组合物包含原型基因小组I和/或原型基因小组II诺如病毒VLP，其中与施用所述组合物前所述人中的滴度相比，所述组合物至少诱导诺如病毒特异性血清抗体滴度的3倍升高。在某些实施方案中，在施用所述单剂组合物的7天内诱导诺如病毒特异性抗体滴度的升高。在一些实施方案中，经由静脉内、皮下、皮内、或肌肉内施用路径对所述人施用所述疫苗组合物。在一个实施方案中，通过肌肉内施用路径对所述人施用所述疫苗组合物。