[发明专利]用于制备永生化细胞的转座子载体、系统及其使用方法有效
| 申请号： | 201510259109.1 | 申请日： | 2015-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN105002217B | 公开（公告）日： | 2020-03-31 |
| 发明（设计）人： | 王宁;何通川;张文文;梁后杰 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;C12N15/85;C12N5/10 |
| 代理公司： | 重庆华科专利事务所 50123 | 代理人： | 康海燕;吴兴伟 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 制备 永生 细胞 座子 载体 系统 及其 使用方法 | ||
1.用于制备永生化细胞的系统，其特征在于：包括含有仅表达SV40TAg的表达元件的载体和表达piggyBac转座酶的载体，所述表达piggyBac转座酶的载体为表达piggyBac转座酶的质粒载体或腺病毒载体；所述含有仅表达SV40TAg的表达元件的载体中,所述表达元件的启动子是hEFH，所述SV40TAg 基因的两端有两个同向的FRT片段，且在该表达元件两端有piggyBac 转座酶剪切位点；SV40TAg 基因序列如 SEQ ID No.1 所示，FRT 片段的核苷酸序列如 SEQ ID No.2所示；在 SV40TAg 表达元件与一个 piggyBac 转座酶剪切位点之间有潮霉素表达元件或新霉素表达元件，所述潮霉素表达元件的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，所述新霉素表达元件的核苷酸序列如SEQ ID No.4 所示。
2.如权利要求1所述的用于制备永生化细胞的系统，其特征在于：所述表达piggyBac转座酶的腺病毒载体表达绿色荧光标记蛋白 GFP 或红色荧光标记蛋白 RFP。
3.权利要求1或2所述用于制备永生化细胞的系统的使用方法，其特征在于：将所述含有仅表达SV40TAg的表达元件的载体与表达piggyBac 转座酶的载体同时导入目的细胞；或者先将所述含有仅表达SV40TAg的表达元件的载体导入细胞，然后再于 48 小时以内导入所述表达piggyBac转座酶质粒载体或腺病毒载体。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国人民解放军第三军医大学第一附属医院，未经中国人民解放军第三军医大学第一附属医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510259109.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
