[发明专利]一种内嵌导轨的滑动数字PCR芯片及数字PCR方法有效
申请号: | 201510252629.X | 申请日: | 2015-05-18 |
公开(公告)号: | CN104862224B | 公开(公告)日: | 2017-05-17 |
发明(设计)人: | 徐洪;陈艳 | 申请(专利权)人: | 中国科学院深圳先进技术研究院 |
主分类号: | C12M1/38 | 分类号: | C12M1/38;C12M1/00 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司11332 | 代理人: | 潘登,邓猛烈 |
地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 导轨 滑动 数字 pcr 芯片 方法 | ||
1.一种内嵌导轨的滑动数字PCR芯片,其特征在于,包括:
一基板,所述基板的一侧面设置有多个导轨滑槽,每个所述导轨滑槽的底面凹入形成有一PCR反应池,每个所述导轨滑槽的一对侧壁上分别设置有一第一流道;
多个第二流道,形成于所述基板上,所述第二流道分别与所述第一流道连通而将所述导轨滑槽依次连通;
一盖板,所述盖板的一侧面设有多个与所述导轨滑槽一一对应的滑块突起,所述滑块突起对应卡合于所述导轨滑槽中而使所述盖板与所述基板紧密贴合,每个所述滑块突起上设置有一第三流道;
当注入待测样液时,所述滑块突起沿所述导轨滑槽滑动使得所述第三流道与所述第一流道连通使得待测样液流入所述PCR反应池中,每个所述PCR反应池注入待测样液后,滑动所述盖板使得所述滑块突起封闭所述PCR反应池。
2.根据权利要求1所述的内嵌导轨的滑动数字PCR芯片,其特征在于,所述导轨滑槽呈矩阵排列。
3.根据权利要求1或2所述的内嵌导轨的滑动数字PCR芯片,其特征在于,所述导轨滑槽为长方体形,所述第一流道设置于所述导轨滑槽的长侧壁上,所述滑块突起为与所述导轨滑槽相卡合的长方体形,所述滑块突起包括第一滑块及第二滑块,所述第二滑块的长度小于所述第一滑块的长度,所述第三流道设于所述第一滑块及第二滑块之间;当所述第一滑块位于所述导轨滑槽顶部的一端时,所述第三流道与所述第一流道连通,所述盖板向所述第二滑块的方向滑动至所述导轨滑槽顶部的另一端时,所述第一滑块覆盖所述PCR反应池使其封闭。
4.根据权利要求1或2所述的内嵌导轨的滑动数字PCR芯片,其特征在于,所述滑块突起的截面形状为圆形、椭圆形及梯形中的一种,所述PCR反应池为长方体、圆柱体中的一种。
5.根据权利要求3所述的内嵌导轨的滑动数字PCR芯片,其特征在于,所述第一流道的深度等于或小于所述导轨滑槽的深度。
6.根据权利要求5所述的内嵌导轨的滑动数字PCR芯片,其特征在于,所述导轨滑槽的长度为450微米,宽度为200微米,深度为50微米;所述第一流道及第三流道的宽度均为60微米,深度为25微米;所述PCR反应池的长度及宽度均为150微米,深度为50微米;所述第一滑块的长度和宽度均为198微米,高度为48微米;所述第二滑块的长度为54微米,宽度为198微米,高度为48微米。
7.根据权利要求6所述的内嵌导轨的滑动数字PCR芯片,其特征在于,所述基板为聚合物基板或玻璃基板;所述盖板为聚合物基板或玻璃基板。
8.根据权利要求7所述的内嵌导轨的滑动数字PCR芯片,其特征在于,所述基板及盖板均为聚合物基板,通过热压或者注塑制成。
9.一种数字PCR方法,其特征在于,利用权利要求6所述内嵌导轨的滑动数字PCR芯片进行数字PCR;
将盖板上的滑块突起与基板上的导轨滑槽对应卡合,使得第一流道与第三流道连通;
向所述内嵌导轨的滑动数字PCR芯片注入待测样液,待测样液经由第一流道、第二流道及第三流道注满所述内嵌导轨的滑动数字PCR芯片上的所有PCR反应池;
向所述内嵌导轨的滑动数字PCR芯片注入矿物油,矿物油将第一流道、第二流道及第三流道中的待测样液排出;
推动盖板沿导轨滑槽滑动至导轨滑槽的顶端使得第一滑块覆盖PCR反应池,将待测样液封闭于PCR反应池中;
固定盖板与基板的位置,放入平板扩增仪进行预设次数的热循环;
检测荧光亮点的数目得到脱氧核糖核酸的绝对量。
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