[发明专利]盐酸克伦特罗分子印迹聚合物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及分子印迹技术领域，具体涉及盐酸克伦特罗分子印迹聚合物及其制备方法。

背景技术

瘦肉精是具有肾上腺素受体激动作用的一类药物的统称，又称β2-兴奋剂，具有促进肌肉生长、提高瘦肉率的作用，曾作为生长添加剂被广泛关注，但β2-受体激动剂在动物体内有一定的残留时间，通过食物链进入人体后会使一些易感人群产生明显的中毒症状，危害人类健康。盐酸克伦特罗(Clenbuterol，CLB)是瘦肉精中的一种，它能够明显促进动物生长，并增加瘦肉率，因而被一些不法分子使用在动物生产中用来增加瘦肉率。研究表明，残留在动物体内的盐酸克伦特罗被人使用后会毒害肾脏、肝脏等器官，会出现头痛不适、恶心呕吐、肌肉颤抖、心率加快、头晕目眩等症状，甚至会导致死亡，因此，我国严禁在动物生产中使用盐酸克伦特罗。现有检测盐酸克伦特罗的方法均需要复杂的样品处理过程和分析步骤，需要大型仪器及经过专门训练的专业人员操作，时间长、成本高，远不能满足在线检测的要求。

试纸法由于具有携带方便、操作简单、测定速度快等特点，在食品、水质、医疗卫生等领域有较多应用。如2001年河南省农科院动物免疫学重点实验室与河南百奥生物工程有限公司于成功研发了“瘦肉精”专用快速检测试纸技术并投放市场，使用该试纸可在60秒内快速直观地检测出肉品中是否含有超过安全标准的“瘦肉精”，该试纸检测技术以单克隆抗体为基础设计而成，检测时胶体金标记的“瘦肉精”单抗被检测线上固定化的“瘦肉精”人工结合抗原捕获，形成一条棕红色的检测线，过量的胶体金标记单抗继续涌动被对照线上固定化的羊抗鼠抗体捕获形成一条棕红色的对照线，如果样品中含有“瘦肉精”，它将与固定化在检测线上的人工抗原竞争有限的胶体金标记单抗。申请号为200810219632.1的中国专利，公开了一种盐酸克伦特罗检测试纸及其检测方法，该纸包括支撑固定粘衬层，在支撑固定粘衬层上依次有样品吸附层、结合垫、微孔虹吸反应层和吸水材料层，在结合垫上有示踪粒子标记的盐酸克伦特罗抗体和示踪粒子标记的抗体A，当样品中含有5纳克以上的盐酸克伦特罗时，检测区出现两条线，当样品中盐酸克伦特罗含量小于5纳克时，检测区出现一条线，该试纸具有与夹心法等同的检测模式及判读方式且成本低，该检测方法简便快捷，操作简单。但上述方法在使用中存在以下问题：超过判读时间容易出现假阴性、假阳性结果，质控线有时不显现，检测线颜色模糊不清，漏检率偏高等，因此，寻找一种快捷、方便、高选择、高灵敏的检测盐酸克伦特罗的试纸方法具有重要意义。

分子印迹是近年来兴起的分子特异性识别技术，具有对模板分子在功能基团、分子尺寸、空间结构具有记忆功能的结合位点，可以根据预定的选择性和高度识别性能进行分子识别，在印迹中形成的特异性识别位点能和被分析物选择性作用，并且这种作用是可逆的，这种合成的材料机械强度和化学稳定性好，能在极端环境中使用。现已有将分子印迹技术结合试纸法制备得到的分子印迹试纸条，不仅具备了分子印迹特异识别能力，且具有试纸条检测速度快、携带方便的特点，但是目前尚未有盐酸克伦特罗分子印迹试纸及其检测方法的相关报道，而制备分子印迹试纸的关键技术是制备适用于该检测方法的盐酸克伦特罗分子印迹聚合物。

发明内容

本发明针对现有的经典盐酸克伦特罗的检测方法前处理复杂、时间长、成本高，现有的试纸法易出现假阴性假阳性结果、漏检率高等现状，提供了一种盐酸克伦特罗分子印迹聚合物及其制备方法，该聚合物合成简单快捷、成本低、特异性强、稳定性好。本发明的盐酸克伦特罗分子印迹聚合物可结合试纸法制成试纸条，用于痕量在线检测盐酸克伦特罗。

本发明的技术方案为：

一种盐酸克伦特罗分子印迹聚合物，该聚合物以盐酸克伦特罗为模板分子，以α-甲基丙烯酸为功能单体，以氢键形式进行相互作用，加入交联剂N，N-亚甲基双丙烯酰胺、引发剂过硫酸铵发生自由基共聚，得到盐酸克伦特罗分子印迹聚合物；

所述模板分子、功能单体、交联剂的摩尔比为117-274:1-300:30-90。

以上所述的盐酸克伦特罗分子印迹聚合物，所述模板分子、功能单体、交联剂的摩尔比优选为9.78:1:3.03。

一种以上所述盐酸克伦特罗分子印迹聚合物的制备方法，包括以下步骤：

1.配制浓度为3×10^-3-3×10^-5mol/L的盐酸克伦特罗水溶液；