[发明专利]漾濞大泡核桃转录因子基因JsWRKY1的应用

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学以及基因工程相关研究领域，特别是具有抗真菌活性的漾濞大泡核桃转录因子基因JsWRKY1的应用。

背景技术

21世纪，人类面临耕地减少、人口增加和人民生活水平不断提高三个不可逆转的局面，提高农作物单产是解决这些问题的重要措施。然而植物病害严重影响农作物的产量和质量，其中，真菌病害是最重要的一类植物病害，约占70％-80％，其发病率极高，且大规模发生时导致农作物减产甚至死亡。传统控制真菌病害的方法主要是选育抗性新品种、采用合理的耕作制度和使用化学农药，这些方法虽然取得了一定成效，但均不能从根本上解决真菌病害问题。近年来，随着分子生物学和生物技术的快速发展，利用基因工程方法培育抗真菌病害的新品种取得了一定成效，有望从根本上解决真菌病害问题。

WRKY是植物体内重要的抗病相关转录因子，通过调控植物体内的病程相关蛋白等抗病相关基因的表达来提高植物的抗病性，在植物抵御病原菌侵染的防卫反应中扮演着重要角色。最早被鉴定的植物WRKY基因是甘薯(Impoea batatas) SPF1 (SPF1:SWEET POTATO FACTOR 1)基因(Ishiguro S, Nakamura K. 1994. Characterization of a cDNA encoding a novel DNA-binding protein, SPF1, that recognizes SP8 sequences in the 5’ upstream regions of genes coding for sporamin and beta-amylase from sweet potato. Mol Gen Genet, 244: 563-571.)。WRKY蛋白被分为三大类，第类含有2个WRKY结构域以及C2H2型锌指结构；第类含有1个WRKY结构域和C2H2型锌指结构，大多WRKY转录因子都属于这一类；第类含有1个WRKY结构域，但所含的锌指结构为C2HC型，此类WRKY转录因子的成员较少(Eulgem T, Rushton PJ, Robatzek S, Somssich IE. 2000. The WRKY superfamily of plant transcription factors. Trends Plant Sci, 5: 199-206.)。采用核磁共振技术研究AtWRKY4的结构发现其C端WRKY结构域由4股β折叠构成，其中β折叠的末端含有一个由保守的半胱氨酸/组氨酸残基形成的锌结合口袋结构。WRKYGQK序列存在于β-1链上，并可以通过扭曲进入DNA凹槽中，从而与靶基因中的W-box相互作用(Pandey SP, Somssich IE. 2009. The role of WRKY transcription factors in plant immunity. Plant Physiol, 150: 1648-1655.)。