[发明专利]一种柱前衍生化-高效液相色谱法测定叔丁基肼盐酸盐的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析技术领域，涉及一种叔丁基肼盐酸盐的定量分析方法，具体涉及一种利用柱前衍生化-高效液相色谱法测定叔丁基肼盐酸盐的方法。

背景技术

叔丁基肼盐酸盐（Tert butyl hydrazine hydrochloride），又名特丁基肼盐酸盐，是一种重要的农药中间体；是合成抑食肼（RH-5849）、虫酰肼（Tebufenozide）、氯虫酰肼（Halofenozide）、甲氧虫酰肼（Methoxyfenozide）、环虫酰肼（Chromafenozide）及哒螨灵（Pyridben）等杀虫剂的重要原料。由于叔丁基肼盐酸盐在生产过程中引入较多的盐酸肼且不易分离。因此，对叔丁基肼盐酸盐的质量控制，直接影响到合成产物的质量。

目前报道的叔丁基肼盐酸盐的测定方法主要有三种：（1）碘量法（氧化还原滴定）；（2）将叔丁基肼盐酸盐衍生化后利用气相色谱法进行测定^[1]；（3）利用离子色谱法检测叔丁基肼盐酸盐^[2]。

以上三种方法均有不足之处。方法一测定过程中，由于叔丁基肼盐酸盐生产过程中会引入盐酸肼的干扰，影响含量测定结果的准确性；方法二测定过程中，衍生物的沸点较高，且溶剂影响较大；方法三中采用的离子色谱仪价格昂贵，不利用推广。

本发明采用普及率较高的高效液相色谱仪，柱前衍生化法对叔丁基肼盐酸盐进行测定。该方法精密度高，重现性好，准确度高，样品处理简单易行，方便可靠。

发明内容

本发明所述的柱前衍生化-高效液相色谱法测定叔丁基肼盐酸盐的方法，采用高效液相色谱仪检测，外标法进行定量。

具体步骤包括。

（1）叔丁基肼盐酸盐对照品溶液的配置：取叔丁基肼盐酸盐对照品（＞98%）一定量，精密称定，配制成10mg/mL的叔丁基肼盐酸盐对照品溶液。

（2）叔丁基肼盐酸盐样品溶液的配置：取叔丁基肼盐酸盐（约90%）适量，精密称定，配制成约10mg/mL的叔丁基肼盐酸盐样品溶液。

（3）衍生试剂的配置：所述的衍生试剂为苯甲醛。取苯甲醛（分析纯）适量，配制成40mg/mL的苯甲醛的无水乙醇溶液。

 （4）衍生方法：取上述叔丁基肼盐酸盐溶液一定量置25mL容量瓶中，加入等体积衍生试剂和PH=5.0的磷酸盐缓冲溶液1mL，置恒温水浴振荡器中，30℃振摇90min。放冷，甲醇定容至刻度。

（5）色谱条件：所述的高效液相色谱仪为依利特1201高效液相色谱仪，紫外可变检测器；Hypersil BDS C18（5μm,4.6×250mm）色谱柱；柱温25℃；流动相为甲醇；流速为1.0mL/min；检测波长为298nm；进样量20μL（定量环）。

 （6）测定方法：分别取叔丁基肼盐酸盐对照品溶液0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL置25mL容量瓶中，按照步骤（4）衍生方法反应结束后，分别取0.5mL置10mL容量瓶中，甲醇定容，0.45μm滤膜过滤。按照步骤（5）色谱条件进行分析，记录峰面积。采用外标法绘制叔丁基肼盐酸盐浓度-叔丁基肼盐酸盐衍生物峰面积标准曲线，并得出标准曲线回归方程。

另取叔丁基肼盐酸盐样品溶液适量，按照步骤（4）衍生方法反应结束后，分别取0.5mL置10mL容量瓶中，甲醇定容，0.45μm滤膜过滤。按照步骤（5）色谱条件进行分析，记录峰面积。根据步骤（6）中回归方程计算叔丁基肼盐酸盐浓度，进而根据叔丁基肼盐酸盐样溶液配制方法计算得出叔丁基肼盐酸盐的含量。

所述衍生试剂为苯甲醛。

所述叔丁基肼盐酸盐与衍生试剂用量为1:3—1:5；优选1:4。

所述衍生反应温度为30℃。

所述衍生反应时间为90min。

所述衍生反应条件为PH=5.0。

所述色谱柱温度为25—35℃，此温度范围内，其他色谱条件不变的情况下，叔丁基肼盐酸盐衍生物均能与其他杂质实现完全分离。

所述色谱柱温度优选25℃。

所述流动相为甲醇、水。在其他色谱条件不变的情况下，甲醇和水的比例在100:0—70:30范围内，叔丁基肼盐酸盐均能与其他杂质实现完全分离，且系统适用性实验满足含量测定的要求。

所述流动相为甲醇。

所述流动相流速在0.8mL/min—1.2 mL/min范围内，叔丁基肼盐酸盐衍生物均能与其他杂质实现完全分离。

所述流动相流速为1.0 mL/min。

所述检测波长为298nm。

所述检测方法中每次测量进样量为20μL。