[发明专利]长链非编码RNAAFAP1‑AS1的引物、检测试剂及其应用有效
申请号: | 201510238836.X | 申请日: | 2015-05-12 |
公开(公告)号: | CN104894244B | 公开(公告)日: | 2018-03-23 |
发明(设计)人: | 向波;曾朝阳;孛昊;李桂源;熊炜;李小玲;李夏雨;龚朝建;阳剑波;廖前进;陈攀;喻建军;石磊 | 申请(专利权)人: | 中南大学 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12N15/11 |
代理公司: | 长沙市融智专利事务所43114 | 代理人: | 袁靖 |
地址: | 410083 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 长链非 编码 rna afap1 as1 引物 检测 试剂 及其 应用 | ||
1.长链非编码RNA AFAP1-AS1的应用方法,其特征在于,用于制备鼻咽癌辅助诊断或者疗效预测的实时荧光定量检测试剂,该长链非编码RNA AFAP1-AS1的序列如SEQ NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的应用方法,其特征在于,所述的实时荧光定量检测试剂中包含
用于实时荧光定量检测AFAP1-AS1表达的引物序列:
正向引物:5’-AATGGTGGTAGGAGGGAGGA-3’,
反向引物:5’-CACACAGGGGAATGAAGAGG-3’。
3.根据权利要求1或2所述的应用方法,其特征在于,所述的实时荧光定量检测制剂为试剂盒。
4.根据权利要求3所述的应用方法,其特征在于,试剂盒中含有:
用于实时荧光定量检测AFAP1-AS1表达的引物序列:
正向引物:5’-AATGGTGGTAGGAGGGAGGA-3’,
反向引物:5’-CACACAGGGGAATGAAGAGG-3’;
内参基因GAPDH特异性PCR引物:
正向引物5’-ACCACAGTCCATGCCATCAC-3’
反向引物5’-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3’。
5.根据权利要求3所述的应用方法,其特征在于,
试剂盒中还含有:
(1)从鼻咽癌组织中抽提总RNA所用试剂,包括RNA稳定溶液、Trizol试剂、三氯甲烷、异丙醇、无酶水;
(2)以总RNA为模板将LncRNA AFAP1-AS1逆转录为cDNA所用试剂,包括逆转录缓冲液、三磷酸碱基脱氧核苷酸、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及随机引物;
(3)将cDNA实时定量PCR所用试剂,包括实时荧光定量SYBR染料、无酶水。
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