[发明专利]长链非编码RNAAFAP1‑AS1的引物、检测试剂及其应用有效

专利信息
申请号: 201510238836.X 申请日: 2015-05-12
公开(公告)号: CN104894244B 公开(公告)日: 2018-03-23
发明(设计)人: 向波;曾朝阳;孛昊;李桂源;熊炜;李小玲;李夏雨;龚朝建;阳剑波;廖前进;陈攀;喻建军;石磊 申请(专利权)人: 中南大学
主分类号: C12Q1/6886 分类号: C12Q1/6886;C12N15/11
代理公司: 长沙市融智专利事务所43114 代理人: 袁靖
地址: 410083 湖南*** 国省代码: 湖南;43
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摘要:
搜索关键词: 长链非 编码 rna afap1 as1 引物 检测 试剂 及其 应用
【权利要求书】:

1.长链非编码RNA AFAP1-AS1的应用方法,其特征在于,用于制备鼻咽癌辅助诊断或者疗效预测的实时荧光定量检测试剂,该长链非编码RNA AFAP1-AS1的序列如SEQ NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的应用方法,其特征在于,所述的实时荧光定量检测试剂中包含

用于实时荧光定量检测AFAP1-AS1表达的引物序列:

正向引物:5’-AATGGTGGTAGGAGGGAGGA-3’,

反向引物:5’-CACACAGGGGAATGAAGAGG-3’。

3.根据权利要求1或2所述的应用方法,其特征在于,所述的实时荧光定量检测制剂为试剂盒。

4.根据权利要求3所述的应用方法,其特征在于,试剂盒中含有:

用于实时荧光定量检测AFAP1-AS1表达的引物序列:

正向引物:5’-AATGGTGGTAGGAGGGAGGA-3’,

反向引物:5’-CACACAGGGGAATGAAGAGG-3’;

内参基因GAPDH特异性PCR引物:

正向引物5’-ACCACAGTCCATGCCATCAC-3’

反向引物5’-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3’。

5.根据权利要求3所述的应用方法,其特征在于,

试剂盒中还含有:

(1)从鼻咽癌组织中抽提总RNA所用试剂,包括RNA稳定溶液、Trizol试剂、三氯甲烷、异丙醇、无酶水;

(2)以总RNA为模板将LncRNA AFAP1-AS1逆转录为cDNA所用试剂,包括逆转录缓冲液、三磷酸碱基脱氧核苷酸、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及随机引物;

(3)将cDNA实时定量PCR所用试剂,包括实时荧光定量SYBR染料、无酶水。

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