[发明专利]一种棘球蚴体外三维培养模型及其应用

权利要求书

1.用于培养棘球蚴的模型，包括培养池和设于所述培养池内的三维胶原支架，其特征在于：所述三维胶原支架上负载有饲养细胞；

所述饲养细胞为原代肝实质细胞和骨髓间充质干细胞；

所述培养池内含有生物培养液；

所述生物培养液为用于培养所述棘球蚴和所述饲养细胞的溶液。

2.根据权利要求1所述的模型，其特征在于：所述饲养细胞中所述原代肝实质细胞和所述骨髓间充质干细胞的数量比为(10-50)：1。

3.根据权利要求2所述的模型，其特征在于：所述生物培养液由溶剂和溶质组成；所述溶剂为低糖DMEM培养基，所述溶质为胎牛血清、青霉素、链霉素、胰岛素、肝细胞生长因子、表皮细胞生长因子、维生素C、脯氨酸、组氨酸、赖氨酸和L-谷氨酰胺；所述胎牛血清在所述生物培养液中的体积百分含量为8％～10％，所述青霉素在所述生物培养液中的浓度为80U/mL～120U/mL，所述链霉素在所述生物培养液中的浓度为80U/mL～120U/mL，所述胰岛素在所述生物培养液中的浓度为1.5μg/mL-2.5μg/mL，所述肝细胞生长因子在所述生物培养液中的浓度为0.8ng/mL～1.2ng/mL，所述表皮细胞生长因子在所述生物培养液中的浓度为8ng/mL-12ng/mL，所述维生素C在所述生物培养液中的浓度为0.15mmol/L～0.25mmol/L，所述脯氨酸在所述生物培养液中的浓度为1.12mmol/L～1.2mmol/L，所述组氨酸在所述生物培养液中的浓度为0.16mmol/L～0.2mmol/L，所述赖氨酸在所述生物培养液中的浓度为1.32mmol/L～1.4mmol/L，所述L-谷氨酰胺在所述生物培养液中的浓度为250mg/L～350mg/L。

4.根据权利要求1-3任一所述的模型，其特征在于：所述模型按照权利要求5或6所述的方法构建。

5.构建权利要求1-3任一所述的模型的方法，包括如下步骤：将所述三维胶原支架用细胞培养基浸泡，然后置于所述培养池内，将所述饲养细胞接种于所述三维胶原支架上，在所述培养池内加入所述生物培养液，得到所述模型。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法中，在所述“将所述饲养细胞接种于所述三维胶原支架上”和所述“在所述培养池内加入所述生物培养液”的步骤之间还包括对接种了所述饲养细胞的所述三维胶原支架进行孵育的步骤；

所述孵育的条件为：37℃细胞培养箱静置；具体为37℃细胞培养箱静置1.5～3h，更具体为37℃细胞培养箱静置2h。

7.培养棘球蚴的方法，包括如下步骤：将原头蚴接种于权利要求1-4任一所述的模型中进行培养。

8.用于培养棘球蚴的系统，其特征在于：所述系统包含培养池和能够设于所述培养池内的三维胶原支架，以及原代肝实质细胞和骨髓间充质干细胞。

9.权利要求1-4任一所述的模型或权利要求8所述的系统在培养棘球蚴和/或在研究棘球蚴发育过程中的应用。

10.权利要求7所述的方法在研究棘球蚴发育过程中的应用。