[发明专利]一种植物乳杆菌液体培养基及植物乳杆菌的发酵培养方法在审
| 申请号: | 201510209378.7 | 申请日: | 2015-04-28 |
| 公开(公告)号: | CN104774795A | 公开(公告)日: | 2015-07-15 |
| 发明(设计)人: | 李职;杨宽民;刘茂锋;黎明;王玄珂;陈辉燕;何庆华 | 申请(专利权)人: | 深圳比利美英伟营养饲料有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/25 |
| 代理公司: | 深圳市恒申知识产权事务所(普通合伙) 44312 | 代理人: | 陈健 |
| 地址: | 518103 广东省深圳市宝*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 植物 杆菌 液体 培养基 发酵 培养 方法 | ||
技术领域
本发明涉及乳酸菌培养技术领域,尤其涉及的是一种植物乳杆菌液体培养基植物乳杆菌的发酵培养方法。
背景技术
植物乳杆菌可以产生有机酸、细菌素、过氧化氢、双乙酰等多种天然抑菌物质,因此应用于生物饲料中既可以产更多的益生菌活菌数,又可以产生天然的抑菌物质,起到饲料防腐的同时,饲喂动物又能更好的维持肠道内菌群平衡,提高机体免疫抗病能力,促进动物更加健康生长。由于在固态发酵基质中的水溶性碳氮源比较少,所以植物乳杆菌利用豆粕、玉米粉效果不好,在固态发酵时要迅速增长繁殖也比较困难。
采用乳酸菌专用MRS培养基进行生产,可以使乳酸菌生长迅速。但是,利用实验室MRS培养基进行工业化大生产的成本也较昂贵,不适合饲用乳酸菌生产。
国内外研究表明,植物乳杆菌培养基中利用葡萄糖或蔗糖作碳源比较常见,薛德林等利用葡萄糖、蔗糖、蔗糖蜜、玉米浆等原材料,发酵生产了高密度的酿酒酵母与嗜酸乳杆菌的饲料用复合微生物制剂(CN103173371A,酿酒酵母与嗜酸乳杆菌的饲料用复合微生物制剂的生产)。虽然菌数达到高数量级,但该工艺需要将酿酒酵母与嗜酸乳杆菌分开发酵并离心浓缩再复配,工艺流程复杂,成本不低。
国内利用果蔬类如菊芋汁、番茄汁替代葡萄糖作碳源的专利也较多,其中田洪涛等利用菊芋汁、番茄汁培养保加利亚乳杆菌,效果不错,成本降低了1600元(CN184435保加利亚乳杆菌复合增菌培养基)。贾英民利用菊芋汁培养双歧杆菌,使双歧杆菌最高生长量达109cfu/mL(CN1584013,一种双歧杆菌发酵用复合培养基及其制备方法)。韩瑨植物乳杆菌ST-Ⅲ接种于灭菌番茄汁中,植物乳杆菌ST-III在该培养基中的发酵增殖效果与实验室常用的MRS培养基相当;但发酵获得相同剂量ST-III活菌花费的成本比MRS培养基降低80%(CN102732470A,一种纯天然、低成本的植物乳杆菌ST-Ⅲ培养方法及其产品和应用)。利用果蔬类原材料做发酵培养基虽然成本有明显降低,但由于菊芋与番茄是人畜共用果蔬,作为饲料添加大量使用将会带来对人类供应的紧张,价格不易控制。
因此,现有技术还有待于改进和发展。
发明内容
本发明的目的在于提供一种植物乳杆菌液体培养基及植物乳杆菌的发酵培养方法,配方中采用糖蜜替代MRS葡萄糖,玉米浆替代牛肉膏,鱼溶浆替代酵母粉,无机氮源替代蛋白胨,同时简化对植物乳杆菌生长影响因素不大的原料,以解决上述现有技术中植物乳杆菌发酵培养存在的成本过高或培养工艺流程复杂的问题。
本发明的技术方案如下:
一种植物乳杆菌液体培养基,其中,其配方组成如下:
糖蜜10-50g/L,玉米浆10-50g/L,鱼溶浆10-50g/L,磷酸氢二铵5-25g/L,乙酸钠2-8g/L,硫酸镁0.5-1g/L,硫酸锰0.1-0.5g/L,吐温1-3mL/L;
其中,培养基的pH值为6.0-6.8左右。
所述的植物乳杆菌液体培养基,其中,其配方组成如下:
糖蜜40g/L,玉米浆10g/L,鱼溶浆15g/L,磷酸氢二铵5g/L,乙酸钠5g/L,硫酸镁0.58g/L,硫酸锰0.25g/L,吐温1mL/L。
所述的植物乳杆菌液体培养基,其中,所述鱼溶浆用鱼粉替代。
所述的植物乳杆菌液体培养基,其中,所述玉米浆用大豆提取液替代。
一种植物乳杆菌的发酵培养方法,其中,包括以下步骤:
以植物乳杆菌为发酵菌株,接入MRS液体培养基中活化处理;将活化后的植物乳杆菌,接入如权利要求1~5任一所述的植物乳杆菌液体培养基中,接种量为4%~10%,进行发酵培养18~24小时;
其中,发酵培养的条件为在30~35℃下厌氧静置培养。
所述的植物乳杆菌的发酵培养方法,其中,所述活化处理的过程为在MRS液体培养基中30℃培养24小时。
本发明所提供的植物乳杆菌液体培养基,以糖蜜、玉米浆、鱼溶浆、磷酸氢二铵等为原料,糖蜜替代MRS葡萄糖,玉米浆替代牛肉膏,鱼溶浆替代酵母粉,无机氮源替代蛋白胨。采用低成本的农业副产品部分或全部替代MRS培养基中的葡萄糖和有机氮源,同时优化培养基组合,不仅提高了植物乳杆菌的菌体数量和有机酸含量,同时明显降低了生产成本。
附图说明
图1为本发明实施例1中实验组和对照组的生长曲线图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚、明确,以下通过详细描述以及举实施例对本发明进一步详细说明。
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