[发明专利]一种用于降解苯醚甲环唑的细菌BMJHZ-01及其筛选方法在审
| 申请号: | 201510206400.2 | 申请日: | 2015-04-27 |
| 公开(公告)号: | CN104789507A | 公开(公告)日: | 2015-07-22 |
| 发明(设计)人: | 赵建庄;蔡慧敏;魏朝俊;贾临芳;梁丹 | 申请(专利权)人: | 北京农学院 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C02F3/34;B09C1/10;C12R1/38 |
| 代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人: | 杨立 |
| 地址: | 102206 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 降解 苯醚甲环唑 细菌 bmjhz 01 及其 筛选 方法 | ||
1.一种用于降解苯醚甲环唑的细菌BMJHZ-01。
2.一种含有权利要求1所述的细菌BMJHZ-01的降解剂。
3.一种如权利要求1所述的细菌BMJHZ-01在降解水体和/或土壤中的苯醚甲环唑残留的应用。
4.一种如权利要求2所述的含有细菌BMJHZ-01的降解剂在降解水体和/或土壤中的苯醚甲环唑残留的应用。
5.一种用于降解苯醚甲环唑的细菌BMJHZ-01的筛选方法,其特征在于,包括:
1)取苯醚甲环唑生产厂废水排水道中的泥样,将泥样置于第一基础盐液体培养基中,泥样与第一基础盐液体培养基的质量比为1:20,摇床培养后得到第一混和菌液,摇床培养的温度为30℃,转速为200转/分钟,时间为7天;
2)将1)得到的第一混合菌液接种到第二基础盐液体培养基中,接种量为第一混合菌液体积量的5%,进行传代培养,培养的温度为30℃,转速为200转/分钟,时间为7天,得到第二混合菌液;
3)取2)得到的第二混合菌液1mL用质量浓度0.9%的无菌生理盐水稀释105倍,然后取100uL涂布到基础盐固体培养基中,30℃暗培养2天,分别收集平板上长出的单菌落,并利用LB培养基划线纯化,30℃暗培养2天,得到多个纯化后的单菌落,所述LB培养基,包括如下原料:蛋白胨9-11g、酵母膏4-6g、氯化钠9-11g、琼脂19-21g和水1000g;
4)取3)得到的多个纯化后的单菌落,每个单菌落接种到一个第三基础盐液体培养基中摇床培养,摇床培养的温度为30℃,转速为200转/分钟,时间为7天,得到多个单菌菌液;
5)取4)得到的多个单菌菌液,每个单菌菌液用一个第四基础盐液体培养基摇床培养,每个单菌菌液的接种量为其体积量的5%,摇床培养的温度为30℃,转速为200转/分钟,时间为7天,摇床培养后,分别测定第四基础盐液体培养基中苯醚甲环唑的残留浓度,并筛选出使苯醚甲环唑浓度降低的单菌菌液,利用标准的菌种鉴定手段鉴定所得单菌菌液,得到细菌Pseudomonas nitroreducens。
6.根据权利要求5所述的筛选方法,其特征在于,在1)中所述第一基础盐液体培养基、2)中所述第二基础盐液体培养基、4)中所述第三基础盐液体培养基和5)中所述第四基础盐液体培养基,为相同的基础盐液体培养基,均包括如下原料:
氯化钠0.9-1.1g、磷酸二氢钠1.4-1.6g、磷酸氢二钠0.4-0.6g、硫酸镁0.1-0.3g、硫酸亚铁0.01-0.02g、氯化钙0.01-0.03g、硫酸铵0.9-1.1g和水1000g,每升上述原料还含有苯醚甲环唑180mg。
7.根据权利要求5或6所述的筛选方法,其特征在于,在3)中,所述基础盐固体培养基,包括如下原料:
氯化钠0.9-1.1g、磷酸二氢钠1.4-1.6g、磷酸氢二钠0.4-0.6g、硫酸镁0.1-0.3g、硫酸亚铁0.01-0.02g、氯化钙0.01-0.03g、硫酸铵0.9-1.1g、琼脂19-21g和水1000g,每升上述原料还含有苯醚甲环唑180mg。
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