[发明专利]具有抗肿瘤活性的羟基磷灰石纳米粒子及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于无机材料及医药领域，更具体地，本发明涉及具有抗肿瘤活性的羟基磷灰石纳米粒子、其制备方法及应用。

背景技术

羟基磷灰石(Ca₁₀(PO₄)₆(OH)₂，Hydroxyapatite简称HAP)是人体骨骼和牙齿组织中的主要无机成分，因其具有对多数蛋白核酸分子表现出吸附性、高结合性、优秀的生物相容性、微弱的细胞毒性、无免疫抗原性、无致肿瘤性以及相对良好的负载转染力与可控释放等优点(Sergey V.Dorozhkin,Biomaterials.，2010，31:1465-1485；He LH，et al.ActaBiomaterials2008；4:577-86)，已被广泛引用于生物医药领域，如生物体植入材料、骨损伤修复、药物载体、抗菌材料、免疫传感器以及基因治疗。作为一种生物相容性良好且可以安全降解的材料，近年来，羟基磷灰石与人体细胞的相互作用情况已成为研究热点。

已有研究显示羟基磷灰石纳米粒子(HAP nanoparticles，HAPN)对肿瘤细胞的生长增殖呈现出一定的抑制作用。但是，目前现有技术中的羟基磷灰石纳米粒子制备方法不一，形态表征不一，性质不一，抗肿瘤效果良莠不齐。现有技术中一般方法生产出的大多数纳米粒子并没有抗肿瘤效果。

因此，本领域需要进一步探索羟基磷灰石纳米粒子的抗肿瘤作用，并且优化其制备技术，以开发出新型的、效果优异的羟基磷灰石纳米粒子。

发明内容

本发明的目的在于提供具有抗肿瘤活性的羟基磷灰石纳米粒子及其制备方法和应用。

在本发明的第一方面，提供一种具有抗肿瘤毒性的羟基磷灰石纳米粒子，该羟基磷灰石纳米粒子为类球状、粒径20～100nm，结晶度低，相态为无定形态且粒子分布均匀。

在一个优选例中，所述的羟基磷灰石粒子对肿瘤细胞的抑制率75％以上，较佳地约80％，具有高抗肿瘤活性。

在另一优选例中，所述的羟基磷灰石纳米粒子的制备方法包括：

(a)在0～8℃，较佳地0～6℃下，将Ca(NO₃)₂水溶液和(NH₄)₂HPO₄的水溶液混合，保持pH10～12，较佳地pH10～11，搅拌反应8～30小时，较佳地为20～30小时；

(b)反应完全后，离心收集沉淀物样品；

(c)洗涤(b)获得的样品；

(d)冷冻干燥处理(c)的样品；较佳地，冻干处理12～36小时；更佳地，冻干处理18～30小时；和

(e)将(d)的样品煅烧，较佳地煅烧1～5小时，如2，3，4小时，获得所述的羟基磷灰石纳米粒子。

在另一优选例中，所述方法的步骤(a)中，Ca(NO₃)₂水溶液或(NH₄)₂HPO₄水溶液的浓度为0.1～0.8mol/L；较佳地为0.15～0.6mol/L；如0.2mol/L；0.3mol/L；0.4mol/L；0.5mol/L；或

步骤(c)中，乙醇和水交替洗涤粒子；较佳地，洗涤1-5次，如2、3、4次；或

步骤(e)中，煅烧的温度是600±100℃；较佳地为600±50℃。

在另一优选例中，步骤(a)中，通过在冰水浴中反应以使得反应温度在0～8℃。

在本发明的另一方面，提供一种制备所述的羟基磷灰石纳米粒子的方法，所述方法包括：

(a)在0～8℃，较佳地0～6℃下，将Ca(NO₃)₂水溶液和(NH₄)₂HPO₄的水溶液混合，保持pH10～12，较佳地pH10～11，搅拌反应8～30小时，较佳地为20～30小时；

(b)反应完全后，离心收集沉淀物样品；

(c)洗涤(b)获得的样品；

(d)冷冻干燥处理(c)的样品；较佳地冻干处理12～36小时；更佳地18～30小时；和

(e)将(d)的样品煅烧；较佳地煅烧1～5小时，如2，3，4小时，获得所述的羟基磷灰石纳米粒子。