[发明专利]一种荷叶总生物碱提取工艺

说明书

技术领域

本发明属于一种从药食两用植物中分离纯化生物碱的方法，具体涉及一种荷叶总生物碱提取工艺。

背景技术

进入二十一世纪，人们对生活品质的要求越来越高，追求健康是幸福生活的前提，因此从天然植物中提取功能性成分进行加工成药品和保健品备受关注。我国的天然织物资源十分丰富，也积累了丰富的临床应用经验，在利用天然织物方面具有得天独厚的优势。充分挖掘尚未得到合理利用的资源，开发无公害的植物天然功能成分及其功能产品，是当前的潮流与趋势。

荷叶是一种既是食物又是药品的天然织物。荷叶是睡莲科植物莲的干燥叶片，具有清暑化湿、升发清阳、凉血止血等多种功效。现代药理学研究表明：荷叶中生物碱具有降血脂，抑制胆固醇、抗氧化等药理活性，是荷叶的主要有效成分。荷叶碱纯品为白色针状晶体，由于荷叶碱为弱碱性有机生物碱，不能直接溶于水，但易溶于甲醇、乙醇、丙酮等亲水性有机溶剂的酸性溶液中，微溶于热的石油醚、乙醚、乙酸乙酯和氯仿中。因此，根据离子交换理论，在酸性条件下，荷叶碱是以阳离子状态存在，可采用离子交换技术分离荷叶碱，对吸附在阳离子交换树脂上的荷叶碱，可采用含有氢离子、钾离子、钠离子等无机离子的洗脱液进行洗脱，该洗脱剂可以是酸性、中性或碱性的亲水性有机溶剂。因此开发出一种荷叶碱的提取纯化工艺是本技术领域人员亟需解决的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，针对以上现有技术存在的缺点，提出一种荷叶总生物碱提取工艺，该提取工艺简单、缩短实验时间、降低能耗、减少实验操作费用和生产成本，提取出来的荷叶总生物碱纯度高。

本发明解决以上技术问题的技术方案是：

一种荷叶总生物碱提取工艺，提取工艺具体操作步骤如下：

（一）荷叶预处理

将新鲜荷叶用磷酸水溶液淋洗一次，蒸馏水浸泡5-10min，淋洗至水溶液至中性，用鼓风干燥箱子干燥含水量8-10%以下，粉碎过40目筛，装入密封料袋中，放入冰箱中冷藏，备用；

其中，磷酸水溶液的pH为3.5-4.5；

（二）荷叶总生物碱的提取

取预处理好的荷叶粉，溶解于pH=2.5的盐酸的水溶液中，微波照射处理后，置于恒温水浴锅中提取2.5h，过滤，滤渣再用盐酸溶液提取1.5h，合并两次滤液，用旋转蒸发仪真空浓缩，过滤，滤液调节pH值至2-3，用氯仿萃取，弃去氯仿层，以除去脂类和树脂；取上层液，加入3%的氢氧化钠调节pH至7左右，静置片刻，待肉眼可见沉淀，过滤，除去鞣质；滤液再加入3%的氢氧化钠调节pH至10.5左右，再用氯仿萃取，在旋转蒸发仪中蒸发干燥后，用pH=2.5的盐酸溶液在超声波清洗机上洗脱生物碱，转移至容量瓶，定容，摇匀得到荷叶总生物碱提取液，备用；

其中，固液比为1:40-1:30；

（三）树脂纯化荷叶总生物碱

（1）树脂的预处理

a.乙醇浸泡：将树脂浸泡在95%或无水乙醇中，并不时用玻璃棒搅拌，使树脂和乙醇充分接触，树脂浸泡时间为18-24h；

b.乙醇冲洗：将浸泡好的树脂装柱，再用无水乙醇冲洗，直至流出液加等量蒸馏水无白色浑浊；

c.蒸馏水冲洗：用大量的蒸馏水冲洗树脂直至流出液无醇味；

（2）装柱

将玻璃层析柱垂直固定在实验架上，关闭底柱活塞，在柱中加入一定量的蒸馏水，然后将树脂带水边搅拌边缓慢加入层析柱中，保持层析柱中水面高于树脂层面3-5cm，过多的水由柱底活塞放出；

（3）上样液的制备

将上述步骤（二）中提取得到的荷叶总生物碱提取液用氢氧化纳调成碱性pH为10-11，再加入无机盐，即得到上样液；

其中无机盐为氯化钠、硫酸钠、硫酸铵中的一种；

(4)吸附和洗脱

将上样液经过装有大孔树脂的玻璃层析柱进行吸附处理，然后再用洗脱剂对玻璃层析柱子进行洗脱处理；

其中，洗脱剂为甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种混合物；

(四) 石油醚萃取与结晶纯化

将步骤（三）中经树脂纯化后的荷叶总生物碱，在60℃条件下，用石油醚萃取，趁热过滤，滤液冷却至室温后，即有少量针状晶体析出后，移至-20℃冰箱中结晶24h，将结晶的晶体抽虑出来，真空干燥5-7h得到高纯度荷叶总生物碱。

本发明进一步限定的技术方案为：

前述荷叶总生物碱提取工艺中，微波照射处理条件为：中火微波辐射2.5-3min。

前述荷叶总生物碱提取工艺中，树脂为AB-8、HP-20、D-101、NKA-9四种大孔树脂中的一种。