[发明专利]一种基于量子点‑金纳米组装超结构对双酚A进行检测的方法

权利要求书

1.一种基于量子点-金纳米组装超结构对双酚A进行检测的方法，其特征在于：该方法以DNA分子为模板制备量子点-金纳米组装超结构，量子点表面修饰的DNA内嵌有目标物的适配体序列，目标物通过与适配体结合使得量子点从纳米组装体中解离，通过组装体荧光强度的变化对目标物浓度进行检测；

所述目标物为双酚A，其适配体序列为：CCGGTGGGTGGTCAGGTGGGATAGCGTTCCGCGTATGGCCCAGCGCATCACGGGTTCGCACCA；

量子点-金纳米组装超结构由两种不同纳米颗粒-DNA复合物组装而成：金纳米颗粒表面修饰DNA即Au-DNA1，量子点表面修饰DNA即QD-DNA2；DNA2嵌入了双酚A的核酸适配体序列；

其中，DNA1序列为SH-(A)₆TGGTGCGAACCCGTGATGCGCTGG，DNA2序列为 NH₂-CCGGTGGGTGGTCAGGTGGGATAGCGTTCCGCGTATGGCCCAGCGCATCACGGGTTCGCACCA。

2.权利要求1所述的检测方法，其特征在于：金纳米颗粒与表面修饰DNA1的摩尔比为1:200；量子点与表面修饰DNA2的摩尔比为1:4。

3.权利要求2所述的检测方法，其特征在于：其中，金纳米颗粒粒径为20-25 nm；量子点粒径为3-5 nm。

4.权利要求1-3任一项所述的量子点-金纳米组装超结构的构建方法，其特征在于：该方法具体包括如下步骤：

1）纳米颗粒表面修饰DNA：

初始浓度为5-10 nM，体积为250-500 uL金纳米颗粒溶液，在转速7500 - 8000 r/min下离心10-15min，加100-200uL 0.5倍的TBE缓冲液，再向金纳米颗粒溶液中加入5-10 uL，100 uM的DNA1，再加入1. 5-2 uL 5M NaCl溶液，反应3h后加入2.8-3.2 uL 5M NaCl溶液，3h后加入3.8-4 uL 5M NaCl，3h后加入5.7-6 uL 5M NaCl溶液，3h后加入11-12 uL 5M NaCl溶液，室温震荡反应过夜，7500 - 8000 r/min下离心10-15min，除去未偶联的DNA分子，形成金纳米颗粒-DNA1复合物即Au-DNA1。

2）量子点表面修饰DNA：

初始浓度为2.5-5 uM，体积为100-200 uL 的量子点水溶液，向其中加入 2.5-5 uL，200 mM的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，再加入20-40 uL，100 uM的DNA2，室温避光震荡反应3-5h，用分子量为10kDa的超滤管纯化2-3次，除去未偶联的DNA分子，形成量子点-DNA2复合物即 QD-DNA2。

3）量子点-金纳米组装超结构的制备：

步骤1）、2）制备的两种纳米颗粒-DNA的复合物：Au-DNA1, QD-DNA2，等体积混合，并加入2-4uL 5M的 NaCl溶液，置于水浴锅中90℃反应3-8 min，快速冷却至室温，形成量子点-金纳米组装超结构。