[发明专利]东风桔药材指纹图谱的构建方法和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及药材检测领域，特别是涉及东风桔指纹药材图谱的构建方法和检测方法。

背景技术

东风桔为芸香科酒饼簕属植物的根，气香，味微辛、苦，性温。具有祛风散寒、行气止痛功效，用于治疗支气管炎、风寒咳嗽、感冒发烧、风湿性关节炎、慢性胃炎、胃溃疡及跌打肿痛等。

东风桔为树根，目前中药材有多种外观与其相似的易混淆品，而现有的检测是否为东风桔的方法较为复杂，如通过对东风桔的根和茎分别作性状、显微观察等研究进行鉴别，其结果也不够直观全面，误差较大。

因此，有必要建立一种准确、简便、全面、直观的东风桔药材检测方法。

发明内容

基于此，有必要提供一种东风桔药材指纹图谱的构建方法和检测方法。

一种东风桔药材指纹图谱的构建方法，包括如下步骤：

精密称取东风桔药材粉末，精密加入甲醇，回流提取或超声提取45-60min，过滤，即得供试品溶液；

精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，得到由18个共有特征峰构成的东风桔药材指纹图谱。

在其中一个实施例中，所述高效液相色谱仪的条件为：

色谱柱为C18色谱柱；流速为0.8-1.2mL·min^-1；检测波长252-256nm；柱温25-35℃；流动相：以乙腈为流动相A，0.5％冰乙酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式。

在其中一个实施例中，所述流速为1.0mL·min^-1，检测波长为254nm，柱温为35℃。

在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0-30min，流动相A的体积百分数由20％变化至50％；30-70min，流动相A的体积百分数由50％变化至100％。

在其中一个实施例中，所述甲醇的用量为每克东风桔药材粉末精密加入19-21毫升。

本发明还提供一种东风桔药材指纹图谱的检测方法，包括如下步骤：

精密称取东风桔药材粉末，精密加入甲醇，回流提取或超声提取45-60min，过滤，即得供试品溶液；

精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定。

在其中一个实施例中，所述高效液相色谱仪的条件为：

色谱柱为C18色谱柱；流速为0.8-1.2mL·min^-1；检测波长252-256nm；柱温25-35℃；流动相：以乙腈为流动相A，0.5％冰乙酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式。

在其中一个实施例中，所述流速为1.0mL·min^-1，检测波长为254nm，柱温为35℃。

在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：0-30min，流动相A的体积百分数由20％变化至50％；30-70min，流动相A的体积百分数由50％变化至100％。

在其中一个实施例中，所述甲醇的用量为每克东风桔药材粉末精密加入19-21毫升。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明经发明人的大量实验和研究，确定了制备供试品溶液的方法、高效液相色谱仪的色谱条件的最优参数，由此构建出东风桔药材的指纹图谱，该指纹图谱中有18个特征共有峰，可较为全面的表征东风桔药材的物理化学特征。

采用本发明方法构建的东风桔药材指纹图谱以及检测方法，可以准确直观地鉴定东风桔药材，同时具有操作简便、结果稳定、精密度高、重现性好等优点。

附图说明

图1为溶剂峰考察HPLC图；

图2为不同流动相条件下HPLC图；

图3为流动相不同起始梯度条件下HPLC图；

图4为最佳流动相起始梯度条件下HPLC图；

图5为不同流速条件下HPLC图；

图6为不同柱温条件下HPLC图；

图7为四个检测波长条件下HPLC图；

图8为四种色谱柱考察HPLC图；

图9为六种提取溶剂考察HPLC图；

图10为不同提取体积考察HPLC图；

图11为不同提取方法考察HPLC图；

图12为不同提取时间考察HPLC图；

图13为东风桔药材样品1-12的指纹图谱；

图14为东风桔药材样品1-12生成的对照指纹图谱；