[发明专利]采用耐盐强化活性纳米垃圾堆肥提高田间草皮耐盐性的方法

权利要求书

1.一种采用强化耐盐菌剂联合纳米堆肥提高田间草皮耐盐性的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

(1) 以灭菌后的土壤为基质进行草坪植物栽培试验，纳米堆肥采用混施的方式施入土壤基质，实验时基质用量为9400g.m^-2，草皮基质厚度为15 mm，高羊茅草种播种量为160g.m^-2，将种子浸泡24h后均匀播洒于基质表层，首先进行黑暗处理，萌发后植株生长初期，每天统一定量给水，以保持培养基质水分状况良好，然后 加入8g 30-35nm纳米堆肥并加入1L稀释100倍的强化耐盐菌剂；或加入8g 30-35nm纳米堆肥并加入1L稀释4倍的强化耐盐菌剂；混合微生物菌群耐盐强化采用的是逐步增加盐浓度的方法，以0.5%的梯度增加到3%；所述的微生物菌群指的是：枯草芽孢杆菌，赖氨酸芽孢杆菌和产黄青霉按体积比1:1:1的比例配制成；

（2）处理后，于2014年4-11月进行株高测定，每次采取随机取样的方式进行测定，其中：

（1）纳米堆肥的制备：

将生活垃圾堆肥105℃烘干至恒重，将垃圾堆肥加工研磨制成30-35nm纳米堆肥，备用；

（2）耐盐微生物菌剂的制备：

将堆肥样品称取10g置于无菌锥形瓶中，加入100mL无菌水振荡均匀后，取10mL悬浮液于盛有100mL富集培养基的锥形瓶中，在28℃，220r/min下振荡培养3d，即为混合微生物菌群；所述的混合微生物菌群中含有枯草芽孢杆菌、赖氨酸芽孢杆菌和产黄青霉；

（3）混合微生物菌群耐盐强化采用的是逐步增加盐浓度的方法，以减轻瞬间高浓度盐对混合菌株造成的冲击和毒害，NaCl的浓度以0.5%的梯度增加到3%，每增加一次NaCl的浓度，要待菌体增长量稳定后，才能继续增加NaCl的浓度，逐级驯化出耐盐微生物菌群；

（4）复合耐盐微生物菌剂的制备：

将强化耐盐微生物在相应的液体培养基上扩大培养，枯草芽孢杆菌和赖氨酸芽孢杆菌在30℃，180r/min培养1d，产黄青霉在28℃，220r/min培养3d，培养后枯草芽孢杆菌，赖氨酸芽孢杆菌和产黄青霉按体积比1:1:1的比例配制成复合微生物菌剂，分别稀释100倍和4倍备用；

（5）草皮建植：

实验设4个处理，每个处理重复3次，实验小区面积为3m×2m，6m²，各处理采用随机区组排列,实验设计如下：

（1）加入1L空白培养基

（2）加入8g纳米堆肥并加入1L空白培养基，

（3）加入8g纳米堆肥并加入1L稀释100倍的复合微生物菌剂，

（4）加入8g纳米堆肥并加入1L稀释4倍的复合微生物菌剂，

处理后，于2014年4-11月进行株高测定，每次采取随机取样的方式进行测定；所述的逐步增加盐浓度的方法指的是：NaCl的浓度分别为0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%和3%，在驯化过程中，视OD600增长而逐步提高盐浓度，NaCl的浓度以0.5%的梯度增加到3%。

2.权利要求1所述采用强化耐盐菌剂联合纳米堆肥提高田间草皮耐盐性的方法在延期草皮枯黄促进草坪草返青率，提高草坪草叶绿素含量方面的应用。

3.权利要求2所述的应用，其中强化耐盐菌剂联合纳米堆肥指的是：加入8g纳米堆肥并加入1L稀释4倍的复合微生物菌剂以及稀释4倍的强化耐盐菌剂联合纳米堆肥。