[发明专利]一种尖叶假龙胆种子无菌萌发的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物种子萌发方法，特别是一种尖叶假龙胆种子无菌萌发的方法。

背景技术

尖叶假龙胆(Gentianella acuta(Michx.)Hulten)，为龙胆科(Gentiananceae)假龙胆属(Gentianella Moench.)植物,又名苦龙胆，药名为阿古特一其其格，为龙胆科一年生草本植物，全草入药。广泛分布于我国河北、东北、内蒙古、山西、山东等地区，苏联、蒙古、北美洲也有分布。多用于蒙、藏医学中,蒙药中称为“阿古特-其其格”，具有清热解毒的功效，是治疗黄疸性肝炎、头痛、发烧等的主药。鄂温克族和鄂伦春族的猎民长期用其治疗心律失常等心脏病且效果显著，是该属唯一一种具有治疗心脏病作用的植物，在蒙医药中有着不可替代的地位。

近年来，由于尖叶假龙胆药用价值的提高，市场需求不断增加，而尖叶假龙胆药材目前100％来源野生资源，因此出现供不应求、过渡采挖现象，致使野生资源蕴藏量日趋减少，资源濒临枯竭。为了缓解资源短缺与开发利用之间日益增大的矛盾，开展人工种植是一种最有效的途径。在繁殖育苗工作中发现，尖叶假龙胆在播种过程中存在发芽率低、发芽不整齐等情况，严重制约着尖叶假龙胆的种苗质量。通过组织培养技术生产优质种苗已经是成为多种植物种苗生产的有效途径，但在开展尖叶假龙胆的组织培养研究时，无菌种子难以萌发成为了制约尖叶假龙胆通过组织培养方式大量生产种苗的关键因素。

发明内容

本发明的目的是提供一种尖叶假龙胆种子无菌萌发的方法，它能够提高尖叶假龙胆种子在无菌条件下萌发，为通过组织培养技术生产尖叶假龙胆组培苗奠定基础。

本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种尖叶假龙胆种子无菌萌发的方法，包括以下步骤：

(1)种子消毒：将尖叶假龙胆的种子冲洗干净，放入20-50％的84消毒液中浸泡消毒5-20分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；

(2)无菌萌发：将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养30天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。

本发明的突出优点在于：

(1)采用所述的尖叶假龙胆种子消毒方法消毒，对种子的损伤较小，培养后种子易于萌发。

(2)采用所述的尖叶假龙胆种子无菌萌发方法进行种子萌发培养，具有种子萌发时间短，发芽率高的特点。

(3)本发明还具有操作简单、方便快捷、成本低等突出优点，对通过组织培养途径切实有效地保护及促进尖叶假龙胆资源的可持续利用具有重大应用价值。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步说明。

实施例1

一种尖叶假龙胆种子无菌萌发的方法，包括以下步骤：

(1)种子消毒：将尖叶假龙胆的种子冲洗干净，放入20％的84消毒液中浸泡消毒20分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；

(2)无菌萌发：将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养30天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，经统计，发芽率为85％。

实施例2

一种尖叶假龙胆种子无菌萌发的方法，包括以下步骤：

(1)种子消毒：将尖叶假龙胆的种子冲洗干净，放入30％的84消毒液中浸泡消毒10分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；

(2)无菌萌发：将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养30天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，经统计，发芽率为92％。

实施例3

一种尖叶假龙胆种子无菌萌发的方法，包括以下步骤：

(1)种子消毒：将尖叶假龙胆的种子冲洗干净，放入50％的84消毒液中浸泡消毒5分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；