[发明专利]定向固定化PEGA复合型树酯的制备方法及应用

权利要求书

1.定向固定化PEGA复合型树酯的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、将2-氨基-6-氯嘌呤和4-硝基苄醇加入溶剂中，在一定温度和碱性条件下发生Williamson成醚反应，生成4-硝基-苄基鸟嘌呤；所述溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的一种或其中任意组合，反应底物摩尔比为1:1，反应温度为80℃，加热回流时间为0.5～24小时之间；

b、将4-硝基-苄基鸟嘌呤经叔丁氧羰基保护，在钯碳催化下常压加氢，溶剂为四氢呋喃，在4-二甲氨基吡啶存在的条件下，加入二碳酸二叔丁酯，搅拌还原生成化合物(3)；钯碳用量为反应原料用量的5％，反应温度为25℃，搅拌时间为5～8小时；

c、搅拌还原生成化合物(3)，苄氧羰基氯保护的γ-氨基丁酸在乙基二甲基碳二亚胺和1-羟基苯并三氮唑的存在下，发生偶合反应，生成化合物(5)；经苄氧羰基保护的反应条件为：NaOH水溶液，室温反应14小时后可得反应产物(4)，发生偶合反应的条件为：加入乙基二甲基碳二亚胺反应0.5小时之后，加入1-羟基苯并三氮唑，搅拌反应2小时得反应产物(5)；

d、发生偶合反应生成的化合物(5)经钯碳加氢还原、分离纯化后，在二氯乙烷、1-羟基苯并三唑的存在下，与表面富含羧基的PEGA反应，并在二氯甲烷、三氟乙酸的作用下，其反应的摩尔比为1:1～1.5酸性条件下，脱保护即得苄基鸟嘌呤衍生物修饰的PEGA树酯(8)；

e、含O6-烷基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶标签一类蛋白质与苄基鸟嘌呤修饰的树酯直接混合后，即发生高效的烷基转移反应，将以硫醚共价键的形式定向固定在PEGA树酯表面，所述O6-烷基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶标签一类蛋白质为ɑ-型受体、β-型受体、M-型受体、N-型受体、血管紧张素受体AT的任一种。