[发明专利]一种体外评价卷烟及烟草安全性的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种体外评价卷烟及烟草安全性的方法。具体是运用含硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活力的溶液，通过检测不同卷烟及烟草制成的烟气水提取液(CSE)对TrxR活力的抑制能力，以CSE在340nm处的吸光度值OD_340nm作为定量基础，评价卷烟及烟草安全性的方法。

背景技术

现代医学研究有足够证据证明吸烟有害健康，而烟气水提取液CSE也已被广泛用于研究烟气毒理机制(参见文献1-5)。CSE中含有焦油、烟碱和醛类等4800种已经确定的物质，其中醛类包括乙醛、甲醛和不饱和醛类，不饱和醛类中的丙烯醛和丁稀醛是危害性最大的几种物质之一。丙烯醛等不饱和醛类是高活泼的亲电子化合物，易与亲核体发生亲核加成反应。研究表明丙烯醛是卷烟烟气导致细胞毒性的主要贡献者(参见文献6)；另外，丙烯醛可增加烟气中苯丙芘等致癌物诱发癌症的风险(参见文献7)。

硫氧还蛋白还原酶TrxR是一种二聚体含硒酶，TrxR的硒半胱氨酸(Sec)对于TrxR催化活性至关重要，它是半胱氨酸的类似物，它的pKa(～5.2)远低于半胱氨酸的pKa(～8.3)，因此Sec在生理pH时处于非质子化的硒醇盐状态，这使它具有极高的亲核活力。TrxR在脱氧核苷酸的形成过程中发挥着关键作用，是DNA合成和细胞增殖过程中必不可少的物质，同时TrxR具有抑制细胞凋亡、提高转录因子的活性等多种生物功能(参见文献8)。TrxR活力被抑制可导致组织损伤等后果(参见文献9和10)。

烟气中的丙烯醛作为活泼的亲电子化合物，也已被证实可与含Sec的TrxR结合，抑制TrxR活力(参见文献11)。

当前对卷烟危害的评价主要依赖成分分析和生物检测。成分分析在卷烟工业中已广泛应用，但由于烟气成分复杂，不同有害物在降焦减害的实践中此消彼涨，依赖于几类物质的评价有一定局限性。利用细胞和动物实验方法评价卷烟安全性周期长，在低危害卷烟研发过程中实用性低。

因此，发展低危害卷烟需要一种即时、迅速、高通量对卷烟及烟草安全性进行评价的手段。

参考文献：

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