[发明专利]一种聚离子胶束纳米粒子的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种聚离子胶束纳米粒子，其特征在于，由多肽与羧甲基壳聚糖组成；所述多肽为水溶性、阳离子性、且具有细胞穿透功能的多肽；所述羧甲基壳聚糖为O-羧甲基壳聚糖，取代度为80％-95％，分子量为50-110KDa。

2.根据权利要求1所述的聚离子胶束纳米粒子，其特征在于，所述多肽为寡聚精氨酸Rn、寡聚赖氨酸Kn、HIV-1的TAT蛋白功能区TAT肽、HIV-1 Rev、低分子量鱼精蛋白中的至少一种。

3.根据权利要求1-2任意一项所述聚离子胶束纳米粒子：其特征在于，粒径为100-250nm,表面带负电荷，Zeta电位为-35～-40mV。

4.制备如权利要求1-3任意一项所述聚离子胶束纳米粒子的方法，其特征在于，由羧甲基壳聚糖和阳离子性多肽在缓冲溶液中以非共价键形式，通过在溶液中自组装法制备而成。

5.制备权利要求1-3任一项所述的聚离子胶束纳米粒子的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)用pH＝7.4的Tris-Hcl缓冲溶液制备多肽溶液，羧甲基壳聚糖溶液；将上述两种溶液分别过0.22μm的微孔滤膜；

(b)使用磁力搅拌器不断搅拌上述的羧甲基壳聚糖溶液中；

(c)将步骤(a)所述的多肽溶液逐滴滴加到步骤(b)所述的羧甲基壳聚糖溶液中；

(d)将步骤(c)得到的最后溶液搅拌，放置稳定，离心，用超纯水复溶，继续离心复溶，重复三次，得到聚离子胶束纳米粒子。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(a)所述多肽溶液浓度为0.5-2mg/mL；所述羧甲基壳聚糖溶液浓度为1-4mg/mL；所述多肽溶液与羧甲基壳聚糖溶液体积比为1:2-1:4。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，将多肽溶液滴加到羧甲基壳聚糖溶液中的滴加速度为1mL/min,滴加过程中溶液需不断搅拌。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤(c)搅拌温度为25-30℃，时间为5-10min；

步骤(d)所述稳定时间为15-20min；离心速度为10000-12000rpm，时间10-15min。

9.根据权利要求1-2任意一项所述的聚离子胶束纳米粒子的应用，其特征在于，作为制备水溶性治疗试剂的载体。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述水溶性治疗试剂的载体包括水溶性光敏剂、抗肿瘤药物、蛋白质或功能性核酸分子的载体。