[发明专利]从龙葵植株中制备β‑谷甾醇亚油酸酯的方法

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种农业技术领域的制备方法，具体地说，涉及的是一种从植物龙葵中制备β-谷甾醇亚油酸酯的方法。

背景技术

龙葵(Solanum Nigrum L.)为一年生茄属植物，是一种分布广泛的杂草，多生于路边，荒地，喜温暖湿润的气候，因其对土壤要求不严，且用种子繁殖，因此非常容易种植，生物量很大。其全草可供药用，常用于治疗疮痈肿毒、肿瘤、皮肤湿疹、小便不利等。目前，国内外对龙葵的化学成分的研究较多，曾有报道在龙葵中含有龙葵碱(solanigrine)、澳洲茄碱(solasonine)等生物碱，以及皂甙、维生素C、树酯等。

β-谷甾醇亚油酸酯是一种重要的植物甾醇酯，有研究报道其具有很强的抗氧化以及杀菌作用。目前植物甾醇酯的获得主要是通过化学合成的办法，即将晶体植物甾醇在高温下熔融，再与酯肪酸缩合生成甾醇酯。但酯肪酸尤其是不饱和酯肪酸在高温下容易发生热分解，因此，化学合成法对于β-谷甾醇亚油酸酯并不十分适用。虽然人们也在研究采用其它的方法制备该化合物，像如采用有机相酶催化酯化反应，但是，从植物中提制仍旧是获得该化合物的一个重要的途径。

经过对现有的技术文献检索发现，目前还没有从植物龙葵中提制β-谷甾醇亚油酸酯的报道。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术存在的不足，提供一种从植物龙葵中提制β-谷甾醇亚油酸酯的方法，该方法以龙葵为原料，采用溶剂提取、浓缩、溶剂萃取和柱层析等工艺方法提制β-谷甾醇亚油酸酯，操作简单，成本低廉且获得的物质纯度较高。

本发明是通过以下技术方案实现的，包括以下步骤：

第一步，将龙葵洗净、晾干后，干燥，粉碎成粉末；

第二步，用龙葵粉末质量的5-40倍的乙醇，常温下浸泡提取(即浸提)，然后过滤，将所得滤液减压真空浓缩，即获得提取液的浓缩物；

第三步，用龙葵粉末质量的1-30倍去离子水溶解上一步所得提取液的浓缩物后，再用0.5-5倍去离子水体积的石油醚萃取至少3次；

第四步，将萃取后的石油醚相减压真空浓缩，采用硅胶柱，以石油醚-乙酸乙酯体系为流动相增大乙酸乙酯比例进行梯度洗脱；

第五步，过完硅胶柱后，以TLC检测搜集目标产物，并收集目标产物，然后减压真空浓缩；

第六步，将第五步所得浓缩物再经过凝胶柱进一步纯化，采用氯仿-甲醇体系为流动相，最终获得淡黄色油状物，即β-谷甾醇亚油酸酯。

优选地，第一步中，所述的干燥，其温度为40℃-50℃。

优选地，第一步中，所述的粉碎是指用中药粉碎机粉碎成10-50目的植物粉末。

优选地，第二步中，所述乙醇是指无水乙醇或20-95％(v/v)的乙醇溶液。

优选地，第二步中，所述的常温下浸泡提取，其时间为8h-72h。

优选地，第二步中，所述的减压真空浓缩是指将溶液抽真空减压到-0.1个大气压，置于40℃-50℃下水浴，使溶液得到浓缩。

优选地，第四步中，采用200-300目硅胶柱。

优选地，第四步中，所述的梯度洗脱的流动相:石油醚与乙酸乙酯的体积比为200:1-1:100。

优选地，第六步中，所述凝胶柱采用凝胶柱Sephadex LH-20。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

1)原材料：采用杂草龙葵为原材料，来源广泛，获取简单，生物量大，成本低廉。并且龙葵作为药用的主要作用成分中不包含β-谷甾醇亚油酸酯，因此，本发明可以很大程度上提高人类对于植物龙葵的有效利用率，并且本发明也是首次从植物龙葵中提制获得β-谷甾醇亚油酸酯。

2)生产工艺：该方法工艺简单，生产实用性强，易于进行大规模工业化生产，此外，该过程中使用的乙醇等有机溶剂可以回收重复循环利用，节约了材料，降低了成本。相比较采用有机相酶催化酯化反应，对条件的要求不高，操作简单，而且所得物质的纯度很高，经过高效液相色谱(HPLC)的定量检测，纯度可达到98％。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。

实施例1