[发明专利]一种用于弓形虫感染预防的药剂及应用

说明书

技术领域

本发明属于免疫疫苗技术领域，具体涉及一种用于弓形虫感染预防的药剂。

背景技术

弓形虫病(toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)感染引起的一种普遍存在的人兽共患胞内寄生虫病，可导致孕畜流产死胎、生产力低下，给畜牧业造成巨大的经济损失。人类如果误食未煮熟的食物或接触环境中的卵囊可导致感染。目前全世界约有1/3的人患有弓形虫病，免疫正常的成年人多不出现明显症状，但免疫功能低下或受损者(如孕妇，器官移植者，HIV病人等)常常导致严重甚至致命的伤害。然而，由于弓形虫生活史及其感染的复杂性，目前尚未有安全有效的药物和疫苗来对抗弓形虫感染，因此研制安全有效的弓形虫疫苗在人与动物弓形虫病防控中具有重要的意义。

发明内容

本发明提供了一种用于弓形虫感染预防的药剂。

本申请人研究发现，CL097为TLR7/8受体的一种配体，可以作为激动剂通过与相应的TLRs结合激活免疫细胞，并调节适应性免疫反应的强度，或改变反应的类型。而氢氧化铝佐剂(Imject Alum)可以通过表面电荷效应能够高效地吸附CL097，在小鼠体内可诱导出抗弓形虫免疫应答。因此，本发明中，采用Imject Alum吸附制备含有5μg CL097/100μl，制成佐剂“Imject Alum+CL097”，并选用弓形虫疫苗“PvAX-GRA16+PvAX-NF3”与“Imject Alum+CL097”联合使用进行免疫效果评估。TLR7/8蛋白结构较为保守，在人与小鼠体内均存在，能高效地诱导小鼠体内产生Th1型免疫应答。CL097作为配体能够刺激TLR7/8蛋白产生Th1型免疫反应。

本发明提供一种用于弓形虫感染预防的药剂，所述药剂是用氢氧化铝佐剂吸附TLR7/8激动剂CL097制备而成的。

优选地，每100μl药剂中所述CL097的含量大于0μg，小于等于5μg；作为优选，每100μl药剂中含3-5μg的CL097；最优选地，每100μl药剂中含5μg的CL097。

在药剂中只要含有CL097，就能够提升免疫疫苗的免疫效果，但是每100μl药剂CL097的含量需要小于等于5μg，否则作为免疫佐剂或疫苗使用后，小鼠会产生其他不良反应。每100μl药剂中含3-5μg的CL097时，作为免疫佐剂或疫苗的效果较佳，当每100μl药剂中含5μg的CL097时，作为免疫佐剂或疫苗的效果最好。

进一步地，所述药剂中还包括缓冲液，所述缓冲液为PBS，所述PBS的含量小于等于药剂总体积的60％；作为优选，所述PBS的含量为药剂总体积的40％-60％；最优选地，所述PBS的含量为药剂总体积的50％。

PBS的体积不能超过药剂总体积的60％，PBS体积含量过高时，氢氧化铝佐剂不能被吸附，短时间内会分层，导致没有效果。在药剂中也可以不加入PBS，此时药剂也具有免疫佐剂和免疫疫苗的功效，但是免疫后小鼠会有一些副作用。经试验，当PBS的含量为药剂总体积的40％-60％时，制备的药剂在具有良好免疫佐剂和免疫疫苗功效的同时，不会产生不良反应；当PBS的含量为药剂总体积的50％时，制备的药剂作为免疫佐剂和免疫疫苗的效果最佳。

进一步地，所述药剂的制备方法为：在常温下温育PBS和氢氧化铝佐剂，再加入TLR7/8激动剂CL097，冰上吸附，完成免疫佐剂的制备。

本发明还提供上述药剂的制备方法，是在常温下温育PBS和氢氧化铝混合液，再加入TLR7/8激动剂CL097，冰上吸附后完成免疫佐剂的制备。

作为优选，每100μl药剂中所述CL097的含量大于0μg，小于等于5μg；作为优选，每100μl药剂中含3-5μg的CL097；最优选地，每100μl药剂中含5μg的CL097。

进一步地，所述PBS的含量小于等于药剂总体积的60％；作为优选，所述PBS的含量为药剂总体积的40％-60％；最优选地，所述PBS的含量为药剂总体积的50％。

更进一步地，是在常温下将pH7.4的PBS与50体积氢氧化铝温育30min，再加入10体积CL097置于冰上吸附30min，完成免疫佐剂的制备。

本发明的第三个目的是提供上述药剂在制备增强弓形虫疫苗免疫效果的免疫佐剂中的应用。

优选地，所述弓形虫疫苗为GRA16和NF3的联合疫苗。

本发明的第四个目的是提供上述药剂在制备增强弓形虫免疫预防的疫苗中的应用。

本发明的第五个目的是提供一种联合疫苗，由GRA16、NF3和本发明的药剂组成。