[发明专利]一种心肌梗死快速检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及疾病检测制剂技术领域，具体涉及一种心肌梗死快速检测试剂盒。

背景技术

心肌梗死(myocardial infarction，MI)是冠状动脉闭塞，血流中断，使部分心肌因严重的持久性缺血而发生局部坏死的病症。临床症状有剧烈而较持久的胸骨后疼痛，发热、白细胞增多、红细胞沉降率加快，血清心肌酶活力增高及进行性心电图变化，可发生心律失常、休克或心力衰竭。心肌梗死是属于冠状动脉粥样硬化性的一种心脏病。

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)是指因持久而严重的心肌缺血所致的部分心肌急性坏死。目前临床上确诊AMI依靠检测心脏标志物、心电图、影像(超声、磁共振)及临床证据，按全球定义标准执行。诊断AMI检测试剂盒的开发与市场化欠规范，产品陈旧，需要新组合产品。2000年AMI全球定义提出检测cTnI、cTnT、MYO、CK-MB作为诊断AMI的第一标准，2007和2012年欧美和全球AMI指南中cTnI和cTnT做为临床诊断依据，不再提MYO、CK-MB。近年来研究发现心脏型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid binding protein，H-FABP)，是极早期确定和排除AMI的重要依据。大量研究和临床资料表明心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)是极早期诊断和排除AMI的标志物，补充cTnI较迟出现的不足。欧美急诊中心联合应用，H-FABP和cTnI，对诊断AMI的阳性预测和阴性排除都达到90％以上。

当前国内医院多用单独检测cTnI、cTnT、CK、CKMB或应用Myo、CKMB、cTnI三联。单独指标不能早、中、晚全程判断AMI，CK、CKMB、Myo、cTnT的诊断假阳性高达30-50％。目前市场常用的急性心肌梗死检测试剂盒多采用以Au纳米颗粒结合抗体形成复合物，检出待测标志物。Au纳米颗粒与抗体蛋白之间通过范德华力进行结合，其结合力不牢固，易造成检测灵敏度不稳和下降、产品批内和批间一致性较低，差异达不到小于10％要求。

发明内容

为了满足急性心肌梗死早期、快速、高灵敏检测重大临床应用的需求，进一步提高检测的灵敏度、准确率和时效性，以便在发病早期予以准确诊断，本发明提供了一种心肌梗死快速检测试剂盒。

本发明提供的心肌梗死快速检测试剂盒，包括cTnI检测试剂、cTnT检测试剂和H-FABP检测试剂。

优选地，所述cTnI检测试剂为cTnI捕获抗体，所述cTnT检测试剂为cTnT捕获抗体，所述H-FABP检测试剂为H-FABP捕获抗体。

优选地，该试剂盒还包括阴性对照试剂和阳性对照试剂，两种对照试剂和三种检测试剂均以纸基为载体，所述纸基为亲水性多孔层状材料，各试剂在纸基上的包被位置互不交叉；所述阴性对照试剂为PBS溶液或Tris盐酸溶液，阳性对照试剂为cTnI捕获抗体。

其中，PBS溶液或Tris盐酸溶液均可以购买市售商品或者自行配制，属于现有技术内容，二者的pH值均优选在7.4～8.0的范围。

优选地，所述纸基为硝酸纤维素纸。以CELLULOSE NITRATE STRIPS11306-41BL最佳，该型号的硝酸纤维素纸购自Sartorius Stedim。

优选地，所述PBS溶液的pH值为7.4～8.0，经过包被的纸基位置由10％(w/v)BSA(牛血清白蛋白)溶液封闭。

优选地，该试剂盒还包括经标记物标记的cTnI、cTnT和H-FABP检测抗体混合液(即经标记物标记的cTn I检测抗体、经标记物标记的cTn T检测抗体和经标记物标记的H-FABP检测抗体三者的混合液)；cTnI阳性对照样品、样本洗涤液1和样本洗涤液2；样本洗涤液1为含有0.05％(v/v)Tween-20的PBS溶液，洗涤液pH值为7.4～7.8；样本洗涤液2为含有0.2％(v/v)Tween-20的PBS溶液，洗涤液pH值为7.4～7.8；当标记物为酶时，该试剂盒还包括该酶的对应反应底物；当标记物为生物素时，该试剂盒还包括对应结合该生物素的亲和素。其中Tween-20为现有常规试剂，可直接购买市售商品。

优选地，所述标记物为辣根过氧化物酶。

另外，本发明的心肌梗死快速检测试剂盒还配有标准曲线测定纸基芯片。标准曲线测定纸基芯片上有多个检测单元。

标准曲线测定纸基芯片，检测浓度范围为0-100ng。每个试剂盒配有标准曲线测定纸基芯片，多个检测单元均包被同一种蛋白捕获抗体。下面以cTn I为例进行说明：