[发明专利]地衣芽孢杆菌菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明具体涉及一种地衣芽孢杆菌菌株及其应用。

背景技术

为了充分利用资源、节约成本，纤维素及半纤维素含量高的物质如米糠、小麦次粉、棉籽粕、秸秆粉、牧草等常被用作原料替代价格高的玉米、大豆、小麦等物质。然高比例的粗纤维日粮不仅不能被畜禽直接吸收利用，还容易引起畜禽腹泻、生长缓慢等各种问题。为改善饲料品质，饲料厂和养殖场已经充分认识到饲料中添加酶类物质，特别是纤维素酶和半纤维素酶等动物自身不能合成的非消化酶的重要性。

植物细胞壁的主要成分由纤维素、半纤维素及木质素构成，纤维素与半纤维素相互交连，纤维素酶水解植物纤维素释放出游离糖后，使得纤维素与半纤维素交连体得到松驰，半纤维素暴露并被木聚糖酶迅速分解成木糖等物质。因为内切葡聚糖酶和木聚糖酶是降解纤维素和半纤维素的最主要水解酶类之一。因此通过内切葡聚糖酶与木聚糖酶的双重水解作用可将饲料中高含量的纤维素、半纤维素降解成易被动物吸收利用的可溶性小分子类碳水化合物，不仅增加饲料的适口性，更提高饲料的吸收利用率，极大促进畜禽的健康成长。

对于饲料加工业，添加单一的酶制剂不仅不能同时满足降解植物细胞壁中纤维素和半纤维素的需求，而且逐一添加各种酶制剂也大大增加了企业的生产成本，因此从应用效果和生产成本的角度出发各类复合酶制剂已越来越受到企业的青睐，大量的动物实验也表明添加复合酶制剂确实大大提高饲料的利用效率。目前选育出来的应用广泛的优良菌种多为木霉、青霉属、黑曲霉等真菌类，由于该类菌生产纤维素酶所用的生产周期长，产酶的同时也产生大量的有毒物质，其代谢产生的粗酶并不能直接添加到饲料中，因此诸如膜过滤等除去有毒物质以提纯纤维素酶的技术程序基本上是生产工业纤维素酶制剂中必不可少的环节。且不说酶在这一过程中出现大量的损耗，这一生产程序的使用及生产周期之长也极大增加企业的生产成本。

豆腐废水，是豆腐在生产过程中形成的豆腐沥水，其产生量是大豆干重的3-5倍。豆腐水固形物含量约占1％，主要由可溶性蛋白质、低聚糖、维生素、脂类、微量元素等组成。我国是豆腐生产和消费的大国，其生产产生大量高浓度有机废水进入地面水，在环境中发酵引起附近水质的严重恶化，严重威胁人类生存环境。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一，在于提供一种地衣芽孢杆菌菌株。

本发明是这样实现的：一种地衣芽孢杆菌菌株，所述菌株为地衣芽孢杆菌菌株BL14(Bacillus licheniformis)，于2014年2月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.8865。

本发明要解决的技术问题之二，在于提供一种所述的地衣芽孢杆菌菌株的应用。

本发明是这样实现的：一种所述的地衣芽孢杆菌菌株的应用，收集豆腐制作中废弃的豆腐废水，调豆腐废水的pH至7.0，置于发酵罐中121℃高压灭菌25min，将所述地衣芽孢杆菌菌株BL14以10⁶cfu/mL的接种量接种于发酵罐内，曝气，33℃培养3天，豆腐废水即发酵成含有内切葡聚糖酶和木聚糖酶的复合酶液。

进一步地，所述内切葡聚糖酶活力的测定方法如下：

用0.05mol/L pH 5.0的磷酸盐缓冲液配制质量分数为l％的羧甲基纤维素钠溶液1.7ml，再加入0.5mL所述复合酶液，0.3ml 0.05mol/L pH 5.5的磷酸盐缓冲液，于50℃反应5min后，加入1mL 3,5-二硝基水杨酸试剂终止反应，然后沸水浴中煮沸5min，稀释后于540nm比色。

进一步地，所述木聚糖酶活力的测定方法如下：用0.05mol/L pH 5.0的磷酸盐缓冲液配制质量分数为l％的木聚糖溶液1.0ml，再加入0.5mL所述复合酶液，1.0ml 0.05mol/L pH 5.5的磷酸盐缓冲液，于50℃下反应10min后，加入1mL 3,5-二硝基水杨酸试剂终止反应，然后沸水浴中煮沸5min，稀释后于540nm比色。

本发明的优点在于：地衣芽孢杆菌菌株BL14能以豆腐废水为唯一的营养物质发酵生长，并生产出内切葡聚糖酶和木聚糖酶的酶液，从而为豆腐废水的回收利用及饲料加工业中内切葡聚糖酶和木聚糖酶制剂的生产提供了新的发酵菌源。

附图说明

下面参照附图结合实施例对本发明作进一步的说明。

图1是本发明中地衣芽孢杆菌菌株BL14的菌落形态图。

图2是本发明中地衣芽孢杆菌菌株BL14的革兰氏染色图。