[发明专利]一种产高纯度2‑酮基‑D‑葡萄糖酸的粘质沙雷氏菌株

权利要求书

1.产高纯度2-酮基-D-葡萄糖酸的粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）SDSPY-136菌株，该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No：10548，其保藏时间为：2015年2月9日。

2.如权利要求1所述的产高纯度2-酮基-D-葡萄糖酸的粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）SDSPY-136菌株在生产2-酮基-D-葡萄糖酸中的用途。

3.采用如权利要求1所述产高纯度2-酮基-D-葡萄糖酸的粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）SDSPY-136菌株生产2-酮基-D-葡萄糖酸的方法，其特征在于，其步骤为：

1）将菌株移接至活化培养基，活化菌株；

2）将活化菌株接种于种子培养基，扩大培养；

3）将扩大培养后的菌株接种到以葡萄糖或海藻糖为碳源的发酵培养基上，进行发酵，发酵液中生成2-酮基-D-葡萄糖酸。

4.如权利要求3所述生产2-酮基-D-葡萄糖酸的方法，其特征在于，步骤1）中活化培养基为斜面培养基，其组成为：蛋白胨5 g/L，氯化钠5 g/L，牛肉膏3 g/L，琼脂20 g/L，pH值7.0；步骤2）中种子培养基为液体种子培养基，其组成为：蛋白胨5 g/L，氯化钠5 g/L，牛肉膏3 g/L，pH值7.0；步骤3）中发酵培养基为：葡萄糖110 g/L，玉米浆10 g/L，KH₂PO₄ 1 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.8 g/L，FeSO₄·7H₂O 0.036 g/L，CaCO₃ 50 g/L，pH7.0。

5.如权利要求4所述生产2-酮基-D-葡萄糖酸的方法，其特征在于，具体步骤为：

1）将粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）SDSPY-136菌株移接斜面活化；

2）配制液体种子培养基，250ml三角瓶装液量为30-40ml，121℃蒸汽灭菌，冷却至室温，接种斜面菌种2环后置于旋转转速为200r/min、旋转半径为40mm的摇床上，29-31℃培养10-15小时，得种子液；

3）配制发酵培养基，250ml三角瓶装液量为30-40ml，115℃蒸汽灭菌20分钟，冷却至室温，接种种子液3-4ml后置于转转速为200r/min、旋转半径为40mm摇床上，29-31℃培养65-80小时结束发酵，离心，取上清液，测发酵液中定葡萄糖、2-酮基-D-葡萄糖酸含量，并计算葡萄糖转化为2-酮基-D-葡萄糖酸的转化率。

6.如权利要求4所述生产2-酮基-D-葡萄糖酸的方法，其特征在于，具体步骤为：

1）将粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）SDSPY-136菌株移接斜面活化；

2）配制液体种子培养基，250ml三角瓶装液量为30-40ml，121℃蒸汽灭菌20分钟，冷却至室温，接种斜面菌种2环后置于旋转转速为200r/min、旋转半径为40mm的摇床上，29-31℃培养10-15小时，得种子液；

3）以5L发酵罐按3L装液量配制发酵培养基，调整pH7.0，115℃实罐灭菌，循环水冷却至30℃后接种培养好的种子液300 ml，进行发酵，初始发酵罐参数设置为：搅拌转速为350r/min，通气量2L/min，罐内压力0.065MPa；发酵过程中控制发酵温度30±0.2℃，通过调节搅拌转速和通气量控制溶解氧为30%-35%；发酵周期为30-40h；离心，取上清液，测发酵液中定葡萄糖、2-酮基-D-葡萄糖酸含量，并计算葡萄糖转化为2-酮基-D-葡萄糖酸的转化率。