[发明专利]一种肿瘤药物靶向载体及应用

说明书

发明公开一种抗肿瘤药物靶向载体及这种载体与抗肿瘤药物的偶联方法，以及所形成的一种抗肿瘤药物。本发明所述的这种肿瘤药物靶向载体为口蹄疫病毒样颗粒。本发明的肿瘤药物靶向载体与抗肿瘤化学药物的化学偶联方法是：用碳二亚胺(EDC)和N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)化学偶联试剂活化肿瘤药物载体，然后再与其它抗肿瘤药物偶联。本发明的抗肿瘤药物能够和肿瘤细胞表面过量表达的整合素受体特异性结合，且无须对其表面进行靶向修饰，可提高抗癌药物的靶向治疗作用。

技术领域

本发明涉及一种抗肿瘤药物靶向载体及这种载体与抗肿瘤药物的偶联，以及所形成的一种抗肿瘤药物。

背景技术

恶性肿瘤已经成为当今威胁人类身体健康的重要疾病之一，全世界每年新增癌症病人在1000万以上，控制癌症已成为全球性卫生战略重点。化学治疗方法依然是治疗恶性肿瘤的主要手段之一，传统的化学治疗方法主要是使用化学药物，如抗肿瘤药物阿霉素（doxorubicin，DOX），来抑制肿瘤细胞的增殖并杀死肿瘤细胞，但大多数的化疗药物都没有专一性，会在抑制肿瘤组织的同时也损伤正常组织，所以，具有不可忽视的毒副作用，如造成免疫功能下降、骨髓抑制、心脏和肝脏毒性等。

为了克服化学药物治疗方面存在的不足，提高化学治疗药物的靶向性——增加肿瘤组织的药物积累，降低药物在正常组织周围的分布——是提高抗肿瘤效果的有效途径之一。为了提高抗肿瘤药物的靶向性，目前常用的方法是将抗肿瘤药物和不同的药物载体相结合，通过对药物载体进行适当的修饰，来提高药物载体靶向运输的能力，从而达到靶向治疗的目的。

发明内容

本发明提供一种肿瘤药物靶向载体，同时本发明也提供了这种药物载体与其它抗肿瘤药物偶联的方式，以及由这一载体与一种具体的现有抗肿瘤药物偶联形成的抗肿瘤药物。

本发明所述的这种肿瘤药物靶向载体为口蹄疫病毒样颗粒。

本发明的肿瘤药物靶向载体与抗肿瘤化学药物的化学偶联方法是：用碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)化学偶联试剂活化肿瘤药物载体，然后再与其它抗肿瘤药物偶联。

本发明所用的肿瘤药物靶向载体与抗肿瘤化学药物的化学偶联方法是：将口蹄疫病毒样颗粒加入到由2-(N-吗啉)乙磺酸溶液溶解的碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的混合物中，在规定的时间内加入抗肿瘤药物进行偶联， 偶联后将混合物转入组装缓冲液中，在组装缓冲液进行透析处理，所用的缓冲液为pH=8.0, 由40 mM Tris-HCl、500 mM NaCl和10mM CaCl₂组成，经处理后偶联上抗肿瘤药物的口蹄疫病毒样颗粒滞留在透析袋内。

本发明的肿瘤药物靶向载体与抗肿瘤化学药物的一种具体化学偶联方法是：配制0.2 mol/L MES, 1 mol/L NaCl，pH 6.0 的2-(N-吗啉)乙磺酸溶液；取0.5 ml的2-(N-吗啉)乙磺酸溶液在其中溶入0.4 mg碳二亚胺，另取0.5 ml的2-(N-吗啉)乙磺酸溶液在其中溶入0.6 mg N-羟基琥珀酰亚胺，依次将溶入碳二亚胺的2-(N-吗啉)乙磺酸溶液和溶入N-羟基琥珀酰亚胺的2-(N-吗啉)乙磺酸溶液加入到1ml浓度为2mg/ml的口蹄疫病毒样颗粒溶液中，室温下活化15分钟，然后加入30 µl 浓度为5 mg/ml的DOX，调节pH=8.0，室温偶联15分钟，随后将反应物转入8000 MWCO 的透析袋中进行透析，除去未偶联的物质得到目标物。

在众多药物载体中，病毒样颗粒（virus/virus-like particles， VLPs）作为一种自组装的天然纳米级生物材料, 除了具有较大的表面积确保载药量的最大化、可通过缓释承载药物发挥持续治疗效果之外，由于病毒样颗粒在结构上和病毒粒子相同或相近，能够模拟自然病毒粒子利用特异受体与宿主细胞结合，而这些特异受体在肿瘤细胞中的表达水平显著提高，这为病毒样颗粒作为肿瘤药物载体的靶向优势提供了前提条件，从而保证携带的药物选择性进入细胞内部、发挥理想药效。