[发明专利]人3型腺病毒展示载体高通量构建方法

权利要求书

1.一种人3型腺病毒展示载体高通量构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)将PCR片段或者合成的核酸片段，纯化后稀释测定浓度20ng-50ng/ul；

2)将步骤1)的PCR片段或者合成的核酸片段转移至96孔Golden gate反应预制板，与配置在所述96孔Golden gate反应预制板混合液进行Golden gate反应；

3)将步骤2)Golden gate反应产物转移至感受态细胞板中，进行Golden gate反应产物转化；

4)将步骤3)Golden gate反应产物转化后的细胞转移至大型LB固体培养基上，分离单克隆抗体；

5)挑取步骤4)制备的单克隆抗体，并培养后转移至96孔PCR克隆鉴定预制板，进行Golden gate反应产物克隆鉴定；

6)将步骤5)鉴定后的阳性克隆转移至96深孔板中，培养后提取克隆质粒，并测定克隆质粒浓度；

7)将质粒送测序。

2.根据权利要求1所述的人3型腺病毒展示载体高通量构建方法，其特征在于，步骤1)所述的纯化采用微珠进行纯化。

3.根据权利要求2所述的人3型腺病毒展示载体高通量构建方法，其特征在于，所述微珠为磁性微珠。

4.根据权利要求1所述的人3型腺病毒展示载体高通量构建方法，其特征在于，每一份所述96孔Golden gate反应预制板反应混合液为1μL，包括如下重量组分：

余量为水。

5.根据权利要求1所述的人3型腺病毒展示载体高通量构建方法，其特征在于，步骤3)中所述的感受态细胞板为96孔感受态细胞板。

6.根据权利要求1所述的人3型腺病毒展示载体高通量构建方法，其特征在于，步骤4)中所述分离单克隆采用画线方式分离。

7.根据权利要求1所述的人3型腺病毒展示载体高通量构建方法，其特征在于，步骤6)中所述克隆质粒采用96孔板质粒提取方法进行提取。