[发明专利]miR-93及其抑制剂在制备抗病毒感染药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，更具体地讲，miR-93及其抑制剂在制备抗病毒感染药物中的应用。

背景技术

病毒感染是威胁人类健康的重要危险因素之一，病毒感染机体后会寄生于宿主并大量复制，在此过程中与免疫系统抗衡并通过各种方式麻痹宿主的免疫系统，威胁人类健康。天然免疫应答是机体对抗病毒入侵的第一道防线，同时是一个在进化中保守的体系。固有免疫细胞如何识别病原体并调控随后发生的免疫反应是天然免疫研究的一个重要方面。研究发现，多种模式识别受体(PRRs)表达与固有免疫细胞表面，用以识别病原体的特定结构组分，进而启动细胞内的信号转导通路，诱导细胞因子与趋化因子的表达，发挥抗感染作用，从而阻止病原体从感染细胞向邻近的未感染细胞扩散。

天然免疫应答中I型干扰素的合成、分泌和干扰素介导的免疫效应起着重要的作用。病毒核酸被相关受体所识别后会强烈诱导I型干扰素的产生。I型干扰素会被可与细胞膜上的I型干扰素受体IFNAR1/2结合，引发级联性的信号放大过程，将信号最后传递到细胞核内，对一系列干扰素刺激基因(ISG)的表达进行调控，诱导靶细胞产生特异性抗病毒蛋白，如双链RNA依赖的蛋白激酶R(PKR)、2’,5’-寡聚腺苷酸合成酶等，并引发抗病毒反应，抑制病蛋白的转录或直接降解病毒mRNA。在这一过程中，IFN-I下游信号通路JAK/STAT途径被多种机制反馈调节，从而保证抗病毒反应进行的同时不会对机体造成过度的炎症损伤，已经有数个miRNA被报道参与了这一过程，例如miR-155、miR-146a等。

microRNA(miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的非编码小片段RNA，其进化保守，通过与mRNA(messenger RNA)的3’非翻译区(3’untranslational region，3’UTR)相互作用从而调控mRNA的翻译，进而广泛作用于发育、肿瘤、炎症等各个生物学过程。

miR-93(miRBase编号：MI0000581)，其序列如下所示：CAAAGUGCUGUUCGUGCAGGUAG(SEQ ID NO:1)。到目前为止，miR-93已经有数个靶基因被报道，通过这些报道我们可以看到miR-93的部分功能。目前已经被报道，miR-93可以通过靶向integrin-β8促进血管生成从而促进了肿瘤细胞的生长。LATS2同样是一个miR-93的靶点，miR-93靶向该基因后可以促进肿瘤的血管生成从而促进肿瘤的生长。但是这些目前这些研究都集中在肿瘤学中，并未阐明miR-93在固有免疫中的作用。

发明内容

本发明的目的在于提供miR-93的新的医药用途，具体是指miR-93在制备抗病毒感染药物中的应用；本发明的另一目的在于提供miR-93抑制剂在制备抗病毒感染药物中的应用。

本发明的主要技术方案如下：

本发明人通过调阅GEO数据库中RNA病毒感染巨噬细胞的miRNA表达芯片，发现miR-93在VSV病毒(水疱性口炎病毒)感染巨噬细胞后后发生了显著下调。但是VSV并非一种强致病性RNA病毒，因此我们选用了自1918年来多次全球性爆发的流感病毒作为研究对象，分析了流感病毒感染后小鼠肺部miRNA的表达情况，发现在感染24小时与36小时后，均有microRNA的表达发生了显著变化，在肺部所有富集表达的miRNA中，miR-93在感染24小时与36小时均发生显著下调，且下调最为显著(图1A)，其具体下调趋势详见表1。而肺部的免疫屏障由多种细胞构成，包括二型肺泡上皮细胞(AT2)、树突状细胞(DC)、成纤维细胞(LF)、巨噬细胞(MΦ)以及T、B细胞。通过定量PCR分析发现miR-93特异性高表达于AT2细胞(图1B)。体外使用甲流病毒(IAVs)感染小鼠原代AT2细胞(图1C)，以及鼠肺泡上皮细胞系MLE-12(图1D)以及人肺泡上皮细胞系A549(图1E)，均发现miR-93发生不同程度的下调。以上结果提示在RNA病毒感染后，miR-93在天然免疫细胞中会发生下调。