[发明专利]经修饰的RNAi多核苷酸及其用途

权利要求书

1.用于抑制靶基因表达的平末端双链RNA(dsRNA)构建体，所述dsRNA构建体包含：

(1)具有5′端和3′端的有义链，其中所述有义链的长度为26、27、28、29或30个核苷酸，其中所述有义链的5′端12个核苷酸和3′端10个核苷酸是2′-修饰的核糖，其防止所述dsRNA构建体被Dicer加工，其中所述2′-修饰核糖是2′-O-甲基核苷酸，和，

(2)具有5′端和3′端的反义链，其中所述反义链的长度为26、27、28、29或30个核苷酸并且所述反义链是未修饰的，所述反义链与所述有义链杂交并与所述靶基因的mRNA杂交，并且

其中所述dsRNA构建体以序列依赖性方式抑制靶基因的表达。

2.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中所述反义链指导靶基因mRNA在从反义链5′端起第10和第11个核苷酸之间的单个位点发生均一切割。

3.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中所述dsRNA的有义链可在从有义链3′端起第10和第11个核苷酸之间的单个位点被RISC切割。

4.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中所述dsRNA的有义链在从该有义链的3′端起第二个核苷酸处包含错配核苷酸。

5.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中所述dsRNA与具有相同序列的未修饰dsRNA相比具有提高的血清和/或脑脊液稳定性。

6.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中所述有义链3′端的最后2至8个核苷酸与其相应反义链核苷酸错配。

7.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中所述dsRNA在原代细胞中不诱导干扰素应答。

8.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中所述有义链的任一端和/或所述反义链的3′端被保护基封闭。

9.根据权利要求8的dsRNA构建体，其中所述保护基是倒置的核苷酸、倒置的无碱基部分或者氨基端修饰的核苷酸。

10.根据权利要求9的dsRNA构建体，其中所述倒置的核苷酸包括倒置的脱氧核苷酸。

11.根据权利要求9的dsRNA构建体，其中所述倒置无碱基部分包括倒置的脱氧无碱基部分。

12.根据权利要求11的dsRNA构建体，其中所述倒置的脱氧无碱基部分是3′，3′-连接的或5′，5′-连接的脱氧无碱基部分。

13.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中所述靶基因是SOD1、PPIB、RIP140、PCSK9、TNFα、脂肪细胞脂质结合蛋白或者MAP4K4。

14.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中2′修饰核糖核苷酸之间的有义链核苷酸是嘌呤核苷酸，任选地具有一个或更多个硫代磷酸酯连接。

15.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中2′修饰核糖核苷酸之间的有义链核苷酸形成一个或多个各为1-5个核苷酸的凸出。

16.根据权利要求1的dsRNA构建体，其中所述反义链的5′端是磷酸化的。

17.用于抑制靶基因表达的RNA构建体，其中所述构建体与权利要求1-16中任一项的dsRNA相同，差别仅在于有义链上的单个缺口。

18.根据权利要求17的RNA构建体，其中所述缺口占据与距反义链5′端10个碱基的核苷酸相对的位置。