[发明专利]鞘氨醇单胞菌T‑3及其共发酵生产生物多糖和聚β羟基丁酸的方法有效
| 申请号: | 201510110078.3 | 申请日: | 2015-03-12 |
| 公开(公告)号: | CN104651284B | 公开(公告)日: | 2017-12-05 |
| 发明(设计)人: | 马挺;吴萌萌;李国强;张文文;陈思彬;周洁芳 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P19/04;C12P7/62;C12R1/01 |
| 代理公司: | 天津佳盟知识产权代理有限公司12002 | 代理人: | 侯力 |
| 地址: | 300071*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 鞘氨醇单胞菌 及其 发酵 生产 生物 多糖 羟基 丁酸 方法 | ||
1.一种鞘氨醇单胞菌T-3发酵生产生物多糖和聚β羟基丁酸的方法,具体方法为:
(1)将鞘氨醇单胞菌T-3单菌落接种至5ml的TPG液体培养基中,30℃振荡培养24小时;
(2)将步骤(1)制得的培养液以1%的接种量接种至100或300ml的种子培养基中,30℃振荡培养24小时;
(3)以10%的接种量将步骤(2)制得的种子液接种至玻璃摇瓶或发酵罐中,30℃,恒定pH 7.2,培养72小时;
(4)将步骤(3)的发酵液用蒸馏水至少5倍体积稀释,90~105℃加热15分钟,膜分离发酵液和菌体沉淀;
(5)将步骤(4)中膜分离后的上清液用稀盐酸调节pH至3.0得到果冻状沉淀,沉淀经NaOH调节至pH中性,将调节至pH中性的沉淀烘干得到生物多糖;
(6)将步骤(4)中的菌体沉淀经烘干后研磨成粉末,加氯仿抽提,低速离心5分钟,上清液经60℃烘干除去氯仿,得到聚β羟基丁酸;
其中:
TPG液体培养基:葡萄糖10g/L,蛋白胨5g/L,酵母粉3g/L,牛肉浸粉3g/L;
种子培养基:蔗糖10g/L,蛋白胨2.5g/L,酵母粉1.5g/L,K2HPO42.5g/L,MgSO40.1g/L,pH 7.0;
发酵培养基:葡萄糖30~50g/L,豆饼粉0.5~2g/L,K2HPO41~2g/L,MgSO40.1~1g/L,NaNO31~2g/L,pH 7.0;
所述鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)T-3的保藏号为CGMCC No.10150,保藏日期为2014年12月10日。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于该方法产生的生物多糖具有明显的增稠作用,良好的剪切稀释性能和耐温、耐酸碱和抗盐性能,生物乳化性能以及成凝胶特性,可应用于建筑,食品,医疗,钻井和采油高技术领域。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于该方法产生的聚β羟基丁酸作为一种生物可降解材料,可应用于电子、光学和生物医学高技术领域。
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