[发明专利]一类超分子水凝胶纳米材料及凝胶因子前体及其制法有效
| 申请号: | 201510106677.8 | 申请日: | 2015-03-10 |
| 公开(公告)号: | CN104650181B | 公开(公告)日: | 2017-07-21 |
| 发明(设计)人: | 梁高林;唐安明 | 申请(专利权)人: | 上海久裕生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C07K5/087 | 分类号: | C07K5/087;C07K1/06;C07K1/04;C12P21/02;C12Q1/42 |
| 代理公司: | 安徽省合肥新安专利代理有限责任公司34101 | 代理人: | 汪祥虬 |
| 地址: | 200433 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一类 分子 凝胶 纳米 材料 因子 及其 制法 | ||
1.一类碘原子标记的超分子水凝胶纳米材料的酶敏感凝胶因子前体的制备方法,其特征在于:先分别合成两段寡肽序列,按:将1毫摩尔2-氯三苯甲基氯树脂在2-3毫升N,N-二甲基甲酰胺里溶胀4-8分钟后,加入2毫摩尔N-芴甲氧羰基-O-磷酸基-L-酪氨酸,再加入2毫摩尔N,N-二异丙基乙胺,反应2-3小时后,用100微升甲醇反应5-10分钟,切去酪氨酸的保护基,加入活化的1.6毫摩尔第二个氨基酸N-芴甲氧羰基-L-4-碘苯丙氨酸反应2-3小时,切去苯丙氨酸的保护基,加入活化的1.6毫摩尔第三个氨基酸N-芴甲氧羰基-L-苯丙氨酸反应2-3小时,切去苯丙氨酸的保护基,加入活化的1.6毫摩尔2-萘乙酸反应2-3小时,最后用体积浓度为1%的三氟乙酸的二氯甲烷溶液从该树脂上切下合成的肽段,用乙醚使其沉淀析出,冷冻离心并倾倒除去上层乙醚,乙醚挥发干后所得白色固体粉末即为萘乙酸修饰的磷酸化寡肽序列——萘乙酸-苯丙氨酸-4-碘苯丙氨酸-酪氨酸-O-磷酸基,经过高效液相色谱分离提纯,收集在紫外波段226纳米及268纳米处有特征吸收的主要组分,即为第一种纯化合物P1;
其中固相肽合成所用的氨基酸都是以9-芴甲氧羰基作为α-氨基保护基,而酪氨酸的侧链酚羟基由磷酸基修饰;其中活化氨基酸的试剂是与氨基酸等摩尔量的1-羟基苯并三唑和苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐,切除9-芴甲氧羰基的试剂是体积浓度为20%的哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液;在每接上一个氨基酸和切去9-芴甲氧羰基保护基时,都采用凯撒测试试剂检测氨基存在与否:若阳性,显蓝色,即表明已脱除9-芴甲氧羰基保护基;若阴性,显黄色,则表明氨基酸已接上。
2.一种权利要求1所述方法制备的超分子水凝胶纳米材料的酶敏感凝胶因子前体即第一种纯化合物P1,其特征在于结构为:
是碘原子标记的可以被牛小肠来源的碱式磷酸酶特异性识别并剪切的化合物。
3.一种以权利要求1方法制备的超分子水凝胶纳米材料的凝胶因子前体即第一种纯化合物P1调制成的碘原子标记的超分子水凝胶纳米材料,其特征在于按照如下配比进行调节成胶:将2毫克的第一种纯化合物P1溶于400微升,pH为7.4,浓度为0.2摩尔的磷酸盐缓冲液中,至第一种纯化合物P1完全溶解形成无色透明溶液,再加入200单位的牛小肠来源的碱式磷酸酶溶液10微升,振荡溶液使之混合均匀,在37摄氏度下孵育10小时至形成超分子水凝胶纳米材料。
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