[发明专利]异甘草素通过抑制CXCL10表达在制备防治肝炎疾病中抗炎药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，涉及异甘草素通过抑制IFN-γ诱导的CXCL10合成发挥抗炎作用的突破性进展，具体是指异甘草素通过抑制CXCL10表达在制备防治肝炎疾病中抗炎药物中的应用。

背景技术

慢性病毒性肝炎的发病是一个多因素相互促进、相互制约的复杂过程。趋化因子,免疫细胞及其分泌的细胞因子积极参与了病毒性肝炎的发生、发展。急慢性肝炎发生发展中肝细胞的凋亡很大程度上是由活化的巨噬细胞、星状细胞和肝细胞本身释放的细胞因子介导的。

CXCL10作为一种趋化因子CXC亚族的成员，又称γ干扰素诱导蛋白10(interferon-gamma inducible protein 10，IP10)。在肝炎的发病中起重要作用,在外源(脂多糖等)和内源(白介素1、干扰素α、干扰素γ等)因子刺激下，可由肝细胞、成纤维细胞、单核/巨噬细胞、T/B淋巴细胞、角质形成细胞和内皮细胞等分泌，IFN-γ是其强的诱导剂。目前已经有临床研究表明慢性活动性肝炎患者中CXCL10水平明显高于正常人。在慢性丙肝(CHC)和慢性乙肝(CHB)病人的血清及肝脏中CXCL10的表达均增高，且CXCL10的高表达与HBV、HCV患者肝脏纤维化的发生密切相关。活动性CHB患者的恢复期，其外周CXCL10表达水平显著下降，表明CXCL10可作为衡量治疗效果及预后的标志。肝组织在干扰素及肿瘤坏死因子α诱导下可分泌高水平的CXCL10，可能成为疾病治疗的靶点。诸多研究表明，CXCL10是肝病过程中将淋巴细胞募集到肝脏的重要因素，可能促进了肝细胞损伤,未来可用作肝脏损伤诊断及治疗成功的有价值的标记。在治疗上应针对CXCL10合成及发挥活性的各个环节予以阻断。例如研制其相应的单克隆抗体、受体抗体及信号转导通路阻断剂等，以期控制该趋化因子对相关免疫细胞的趋化作用，降低有害免疫反应和炎症反应。

异甘草素(isoliquiritigenin)是一种异黄酮类化合物，为黄色针状结晶，难溶于水，溶于极性小的溶剂，如乙醚、氯仿等；已有研究表明虽然异甘草素在甘草中含量仅占万分之七左右，但具有较强的抗病毒、抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗血管生成、催眠等众多生物活等作用，并能扩张动脉，对心脏和脑有保护作用。其中，抗炎作用是近年来研究的热点。异甘草素是一种醛糖还原酶抑制剂，它通过抑制环氧合酶、脂氧合酶、过氧化物酶的活性，来抗血小板凝集，起到抗炎作用。基于以上实验及临床事实，我们认为应进一步开发利用异甘草素。

本发明使用的异甘草素化合物购自成都瑞芬思生物科技有限公司(Chengdu Herbpurify CO.,LTD)，用DMSO配制成10mg/ml,储存于-20℃备用。

异甘草素的结构式如下：

发明内容

本发明的目的在于提出异甘草素在肝炎抗炎治疗中的用途，具体地涉及通过抑制CXCL10表达作为肝炎抗炎治疗的有效辅助手段。

本发明通过以下技术方案来实现：

式(1)所示异甘草素在制备防治肝脏炎症的药物中的应用。所述的药物为具有抗炎作用的药物。

所述抗炎药物中的炎症包括各种病因引发的肝脏炎症反应。所述肝脏炎

症为伴随CXCL10高表达的肝炎疾病。

所述的药物为防治IFN-r诱导靶细胞高表达CXCL10的药物；所述的药物

为抑制CXCL10表达的药物。

所述药物中化合物异甘草素的浓度为5μg/ml，2.5μg/ml或1.25μg/ml。优选的，所述药物中异甘草素的最优浓度为5μg/ml。

首先我们用IFN-r处理HepG2和L02细胞构建炎症模型，MTT实验检测其细胞毒性，ELISA检测CXCL10的表达情况。根据细胞毒性及CXCL10表达水平确定IFN-r最佳刺激浓度和刺激时间；5μg/ml异甘草素预处理能显著抑制CXCL10表达。进一步用RT-PCR实验验证，发现CXCL10的mRNA表达水平亦受到了显著的抑制。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明提供了异甘草素在肝脏炎症中发挥抗炎作用的应用，在构建肝炎模型的基础上，通过MTT、ELISA、qRT-PCR等实验方法验证异甘草素体外抗炎效果，结果表明异甘草素能够抑制CXCL10的表达，可用于肝炎抗炎制剂的制备，表明了异甘草素的抗炎作用可用于临床中部分肝炎患者。

附图说明