[发明专利]类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂及应用

说明书

技术领域

本发明涉及类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂及应用，属于类弹性蛋白多肽的医药配置品及用途。

技术背景

在消化道内窥镜治疗中，内窥镜下黏膜切除术（EMR）及内窥镜黏膜下剥离术（ESD）是目前广泛应用于切除消化道癌前病变与消化道早期肿瘤的标准微创治疗手段。它们不仅可以使患者避免外科开腹手术的痛苦，还可以进行剥离后组织回收，进行病理学诊断，指导术后复查及进一步治疗，因此逐渐成为治疗治疗早期消化道肿瘤的首选方法。尽管这种内镜下治疗具有方法简便、创伤性小，疗效可靠的优势，但是其操作技术难度高，存在着相当比例的穿孔、出血等并发症，因而要求操作者具有更加熟练的操作技术，限制了其临床应用的发展和提高。

在内镜治疗操作中，有效的黏膜下软组织分离制剂注射，可使使黏膜下层与固有肌层分离，有效的分离病变组织与正常组织，以便于操作，预防和减少并发症，已成为提高内镜下黏膜切除治疗安全性的有效措施。但是，传统的软组织分离制剂如生理盐水等，在注射后的维持时间短、重复注射率高，不能有效地减少内镜治疗并发症的发生率，大大降低了内镜治疗的安全性。因此非常有必要寻找新型理想的软组织分离制剂以提高内镜下黏膜切除治疗的高效性和安全性。

类弹性蛋白多肽(Elastin-like polypeptides,ELPs)是一种用基因工程方法获得的蛋白质聚合物，其结构主要由五肽重复序列（Val-Pro-Gly-Xaa-Gly，即缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸-X氨基酸-甘氨酸）构成，来源于弹性蛋白的疏水区域，其中Xaa可以是除脯氨酸以外任一氨基酸。它具有一定的热敏性，当环境温度低于类弹性蛋白多肽的转相温度时，类弹性蛋白多肽呈液体状态；而当环境温度高于转相温度时，类弹性蛋白多肽聚集呈凝胶状。由于类弹性蛋白多肽具有这种特殊性质，加之有良好的组织相容性、非免疫原性，这为其在生物医学材料方面的研究和利用提供了依据。

目前，类弹性蛋白多肽多在组织工程上应用。其水凝胶体已成功应用于软骨、椎骨的组织修复、血管的移植、膀胱干细胞基体神经引导干细胞薄片及手术后的伤口愈合。另外，其在靶向肿瘤和构造药物载体微粒方面也取得了一定的研究进展。

发明内容

本发明就是为了解决现有技术中，传统的软组织分离制剂在注射后的维持时间短、重复注射率高，不能有效地减少内镜治疗并发症的发生率，提高内镜治疗的安全性等问题，而提供一种以类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂及应用。

本发明是按照以下技术方案实现的。

一种类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂，将类弹性蛋白多肽风干絮状固体物质溶于磷酸盐缓冲液制成的终浓度为500uM-1000uM的液体制剂，尤其是浓度为500 uM。

类弹性蛋白多肽分子量为50kD，纯度为大于99%。

本发明所述的类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂具有温敏特性，当温度超过其相变温度37℃时，其可由液态转化为凝胶状态。

本发明所述的类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂的使用量为单次注射5-10ml。

一种类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂的应用，其是将类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂填充于胃肠道黏膜下层，类弹性蛋白多肽相变为凝胶状，使胃肠黏膜与固有肌层充分分离。

使用时，利用消化内镜进镜，到达操作部位，在内镜下通过注射针，于黏膜下层注射类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂，待黏膜与固有肌层充分分离，进行病变黏膜剥离切除。

本发明的有益效果是：在内镜治疗操作中，应用类弹性蛋白多肽制备的软组织分离制剂注射于胃肠道黏膜下层，使黏膜与固有肌层充分的分离，以利于完全切除病变组织。该软组织分离制剂在体温下，由注射时的液相流动状态变相为类凝胶状态，使注射后的软组织分离距离显著增加，且保留时间延长，而不需多次注射，为手术提供良好视野和操作空间，从而提高成功率和减少手术时间，大大减低了内镜治疗并发症如穿孔、出血的发生；该软组织分离制剂具有良好的生物相容性，无毒副作用；其可降解特性更消除了异物残留的担忧。由于本发明适用于消化内镜下治疗中的软组织分离，以便切除病变组织，使操作更安全有效。

附图说明

图1 是不同黏膜下注射剂对SD大鼠胃黏膜厚度随时间变化的影响；

图2是每一时间点各组间黏膜厚度变化的对比图；

图3是30min时不同注射液维持黏膜厚度的组织学表现；

图4是黏膜切除后20min出血量对比图；

图5是注射ELPs内镜下黏膜剥离术标记图；

图6是黏膜下注射ELP后黏膜的隆起；