[发明专利]一种构建茶树DNA指纹图谱的方法有效
| 申请号： | 201510089500.1 | 申请日： | 2015-02-27 |
| 公开（公告）号： | CN104651515A | 公开（公告）日： | 2015-05-27 |
| 发明（设计）人： | 孙威江;林志坤;陈志丹 | 申请（专利权）人： | 福建农林大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 构建 茶树 dna 指纹 图谱 方法 | ||
1.一种构建茶树DNA指纹图谱的方法，其特征在于：采用ISSR分子标记技术和二维码技术构建茶树DNA指纹图谱，将指纹图谱信息通过二维码技术处理，转化成二维码图形。
2.根据权利要求1所述的构建茶树DNA指纹图谱的方法，其特征在于：所述方法具体实施如下：
采用改良CTAB法提取供试茶树品种的总DNA，通过琼脂糖凝胶电泳检测其浓度和纯度，并将DNA样本稀释至100 ng/uL，利用优化后的ISSR反应体系和筛选的引物对茶树DNA样本进行PCR扩增，将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，分离ISSR分子标记，拍摄电泳图片；根据ISSR图谱条带的有无，对PCR扩增产物进行统计分析，将电泳图谱转换成“0-1”形式的原始字符串，利用二维码技术处理原始字符串，将原始字符串转化成为二维码图形。
3.根据权利要求2所述的构建茶树DNA指纹图谱的方法，其特征在于：所述对PCR扩增产物进行统计分析，是根据ISSR图谱条带的有无，利用人工方法统计读带，将电泳图上稳定出现的条带，无论强弱均赋值为“1”，同一位置无条带赋值为“0”， 输入读带数据，建立原始字符串。
4.根据权利要求2所述的构建茶树DNA指纹图谱的方法，其特征在于：优化后的ISSR反应体系为：在20μL体系中，Ex-Buffer用1×Ex-Buffer，1U/μL Ex-Taq酶，0.2mM/μL dNTPs，0.5mM/μL ISSR引物，2ng/μL DNA模板。
5.根据权利要求2所述的构建茶树DNA指纹图谱的方法，其特征在于：筛选的引物如SEQ ID NO.1-12所示。
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