[发明专利]类孢子细胞子群及其用途有效
申请号: | 201510088784.2 | 申请日: | 2010-11-11 |
公开(公告)号: | CN104726394B | 公开(公告)日: | 2018-12-18 |
发明(设计)人: | M·P·瓦森提;C·A·瓦森提 | 申请(专利权)人: | VCell治疗股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/074;C12N5/0789;C12N5/0797;C12N5/0775 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人: | 丁香兰;韩蕾 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 孢子 细胞 子群 及其 用途 | ||
1.一种分离的类孢子细胞子群,其包括细胞,所述细胞表达两种或多于两种选自由以下各物组成的群组的标记物:八聚体转录因子4(Oct4)、锌指蛋白296(Zfp296)、隐藏家族蛋白1B(cripto)、生长分化因-3(Gdf3)、未分化胚胎细胞转录因子1(UtF1)、胚胎干细胞相关性转录物1(Ecat1)、胚胎干细胞特异性基因1(Esg1)、性别决定区Y框蛋白2(Sox2)、双链复合蛋白6(Pax6)、巢蛋白、干细胞抗原1(SCA-1)、分化蛋白簇29(CD29)、分化蛋白簇34(CD34)、分化蛋白簇90(CD90)、B1整合素、酪氨酸蛋白激酶(cKit)、表面活性蛋白C(SP-C)、克拉拉细胞10蛋白(CC10)、剪接因子1(SF1)、剂量敏感性别倒错基因1(DAX1)和颈上神经节10蛋白(SCG10),所述细胞是从选自由外胚层、中胚层和内胚层组织组成的群组的出生后动物组织分离,其中所述细胞在缺氧最少4小时之后仍可存活。
2.根据权利要求1所述的类孢子细胞子群,其中,所述细胞是从中胚层分离。
3.根据权利要求2所述的类孢子细胞子群,其中,所述出生后动物组织选自由哺乳动物、禽类、爬行动物和两栖动物组织组成的群组。
4.根据权利要求3所述的类孢子细胞子群,其中,所述组织选自由心脏、肠、膀胱、肾脏、肝脏、肺、肾上腺、皮肤、视网膜和胰脏组成的群组。
5.一种分离类孢子细胞子群的方法,其包含以下步骤:
(a)从分化的组织分离类孢子细胞,其中所述细胞在缺氧最少4小时之后仍可存活,
(b)在基础培养基中培养所述类孢子细胞一段有效地表达两种或多于两种选自由以下各物组成的群组的标记物的时间:Oct4、Zfp296、cripto、Gdf3、UtF1、Ecat1、Esg1、Sox2、Pax6、巢蛋白、SCA-1、CD29、CD34、CD90、B1整合素、cKit、SP-C、CC10、SF1、DAX1和SCG10,以及
(c)使用标记物特异性结合搭配物来鉴别表达所述两种或多于两种标记物的细胞。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,所述细胞是使用所述标记物特异性抗体分离。
7.根据权利要求6所述的方法,其包含以下步骤:(a)使培养的所述类孢子细胞与标记物特异性结合搭配物在足以使所述结合搭配物与其在可能存在的目标结合的条件下接触,所述标记物选自由以下各物组成的群组:Oct4、Zfp296、cripto、Gdf3、UtF1、Ecat1、Esg1、Sox2、Pax6、巢蛋白、SCA-1、CD29、CD34、CD90、B1整合素、cKit、SP-C、CC10、SF1、DAX1以及SCG10;和(b)分离所述标记物阳性细胞。
8.根据权利要求7所述的方法,其中,所述细胞是使用荧光活化细胞分选法分离。
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