[发明专利]一种促进人工栽培铁皮石斛生长的方法

说明书

本发明涉及铁皮石斛研究与开发应用，旨在提供一种促进人工栽培铁皮石斛生长的方法。该方法是在Basal培养液中加入铁皮石斛多糖等产物及甘油，配制成野生铁皮石斛附生藻的培养液DCA‑M；从野生铁皮石斛茎上分离附生藻，并经高温干燥环境下进行压力筛选，获得保湿耐旱性能好的附生藻；对附生藻进行培养并喷施于人工栽培的铁皮石斛苗，可起到显著的促生长作用。本发明方法与传统促生长方法相比，具有操作简便、成本低、效果明显、对操作人员的专业技术无特殊要求、应用性强等优点，可为人工栽培铁皮石斛高产、优质生产等提供必要的技术方法。

技术领域

本发明涉及铁皮石斛研究与开发应用的技术，特别涉及促进人工栽培铁皮石斛生长的方法。

背景技术

石斛属(Dendrobium)是兰科(Orchidaceae)植物中的第2大属，迄今已发现全球有1500多个种，我国有70多个种[宋经元，郭顺星.近10年来石斛属植物的研究进展.中国药学杂志，2004，39(10)：25～27]。其中，以铁皮石斛(Dendrobium candidum Wal1.Ex Lindl.)为代表的一些品种是我国传统的名贵中药材，在《本草纲目》等古医书中被列为上品。现代科学研究与临床实践证明，石斛药材除具有如古医书记载的滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、明目强身、镇痛消炎等功效外，还具有显著的抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗血栓、抗血小板凝集及增强机体免疫力等功效。近年来石斛药材的需求量不断增加，而石斛属植物的生境较为独特，自然繁殖率低，导致天然石斛无序采集，野生资源锐减，部分石斛品种已濒临灭绝。近10多年来，石斛人工栽培技术取得了很大发展，并已实现大面积推广与商业化应用。但如铁皮石斛等一些名贵品种在人工栽培条件下从组培苗到成品采摘仍需2年多的时间。若使用生长激素等化学物质，虽可明显加快生长、缩短生产周期，但产品的品质及食用安全性等却受到严重影响。石斛属植物与其它附生兰科植物一样，其根群不与土壤接触(即生不入土)，而是附着在树的枝干或岩石上生长，利用雨露、空气中的水汽及有限的腐殖质(腐烂的枯枝残叶或动物排泄物等)为生，它们对生态环境的要求十分严格，高温高湿的热带雨林通常是它们生长、繁殖的最佳环境[张绍云，马伟光，尚建华等.思茅地区石斛属植物资源的调查.云南中医学院学报.2005，28(1)：24～27]。为此，迫切需要通过研究为人工栽培铁皮石斛建立类似其野生生长环境的模式，以促进当前人工栽培铁皮石斛产量和品质的提升。

发明内容

本发明要解决的问题是，克服现有技术中的不足，目的是提供一种促进人工栽培铁皮石斛生长的新方法。

为解决技术问题，本发明的方案是：

提供一种促进人工栽培铁皮石斛生长的新方法，包括以下步骤：

(1)将50g野生或人工栽培铁皮石斛新鲜茎段剪成1cm的小段并置于研钵内，加入50ml Basal培养液[陈峰，姜悦主编.微藻生物技术.中国轻工业出版社，1999，P 61]并充分研碎，将研碎物转入1000ml烧瓶中，加入600ml Basal培养液并用玻璃棒充分搅拌直至块状物散开，置于50℃恒温水浴中保温4h，期间不时搅拌；

(2)将(1)中的保温液用100目尼龙筛绢过滤，再用300ml Basal培养液润洗烧瓶及筛绢上的滤渣，将滤液用Basal培养液定容至1000ml，并加入2ml甘油，即配制成野生铁皮石斛附生藻培养液，记为DCA-M；

(3)用浸蘸DCA-M的棉签轻拭野生新鲜铁皮石斛茎上的藻斑，尔后将棉球放入盛有5ml DCA-M的50ml烧杯中润洗，重复轻拭-润洗10次，直至烧杯中的藻液呈淡绿色，并用100目的尼龙筛绢过滤；

(4)将滤得的藻液置恒温光照培养箱中培养，温度25℃，光照40μmol·m^-2·s^-1，待藻液在分光光度计波长560nm处的光密度OD₅₆₀达0.8时，用DCA-M稀释使OD₅₆₀至0.1，在上述条件下继续放大培养，如此反复，直至OD₅₆₀达0.8的藻液达100ml；