[发明专利]用于制备放射性免疫缀合物的方法

说明书

本发明公开制备包含单克隆抗体(mAb)(IgG)的放射性缀合物的方法。所述的Ac‑225放射性免疫缀合物为[Ac‑225]‑p‑SCN‑Bn‑DOT AIHuM195放射性免疫缀合物。

本申请是2010年7月22日提交的同名发明专利申请201080036704.4的分案申请。

本专利公开包含受到版权保护的材料。版权所有人不反对美国专利及商标局的专利文件或记录中出现的对专利文件或专利公开的传真复制，但除此之外任何情况下均保留任何及所有的版权。

本文提及的所有公开、专利申请、专利和其他文献均以引用方式全文并入本文。本文所指出的专利和科学文献建立了本领域的技术人员可利用的知识。本文所引用的专利公开、申请和其他公开以引用方式并入本文，如同每一份文献均以引用方式具体且单独地指出并入本文。在矛盾的情况下，以专利公开为准。

【背景技术】

在诊断和治疗医学过程中可以使用放射性免疫缀合物。放射性药物可以携带至少一种与载体结合的放射性核，例如靶向部分。放射性核可以产生可通过放射学诊断设备检测的信号。由于放射性核发出的辐射对组织具有毒性作用，所以放射学免疫缀合物可以用于取得一种或多种治疗作用。当定位于肌体中的特定结构或位点处的放射性免疫缀合物用作治疗试剂时，其可以用于将放射性免疫缀合物的作用集中在待治疗的结构或位点中，并且可以减少肌体中其他结构和位点处的有害作用。例如，放射性免疫缀合物可以用作杀死癌组织的化疗药品。需要用于制备放射性免疫缀合物的改善的方法。本发明解决了这种需要。

【发明概述】

在一个方面中，本文所述的方法涉及制备锕-225(Ac-225)放射性缀合物的方法，该方法包含以下步骤：(a)在缀合反应混合物中，使螯合试剂与生物分子缀合，从而制备缀合的生物分子；(b)纯化所述的反应混合物从而除去未缀合的螯合试剂；以及(c)在螯合反应混合物中，使一个或多个Ac-225放射性核与缀合的生物分子螯合，从而制备Ac-225放射性缀合物。

在一个实施方案中，步骤(a)中的缀合包含在大约37℃下将缀合反应混合物温育1.5小时。在另一个实施方案中，步骤(a)中的缀合包含在大约16℃至大约20℃下将缀合反应混合物温育大约24小时。

在另一个实施方案中，纯化包含使缀合反应混合物通过过滤器过滤以便纯化缀合的生物分子。

在一个实施方案中，缀合反应混合物包含碳酸氢盐缓冲剂。在另一个实施方案中，缀合反应混合物包含磷酸盐缓冲剂。在另一个实施方案中，缀合反应混合物的pH为大约8.0至大约9.2。

在一个实施方案中，过滤是在HEPES缓冲剂中进行的。在另一个实施方案中，过滤是在NaAc缓冲剂中进行的。在另一个实施方案中，过滤包含阻隔的分子量为至少大约10,000Da、至少大约20,000Da或者至少大约40,000Da。

在一个实施方案中，螯合反应混合物包含龙胆酸或抗坏血酸。

在另一个实施方案中，螯合反应混合物的pH为大约5.5至大约7.0。

在另一个实施方案中，步骤(a)中的螯合包括在大约37℃下将一个或多个Ac-225放射性核与缀合的生物分子温育大约1.5小时。

在另一个实施方案中，所述的方法进一步包括将终止螯合剂加入到螯合反应混合物中的步骤。在一个实施方案中，终止螯合剂为二乙烯三胺五乙酸(DTPA)。在另一个实施方案中，所述的方法进一步包括在加入终止螯合剂的步骤之后在大约37℃下将螯合反应混合物温育大约30分钟的步骤。

在一个实施方案中，所述的生物分子包含蛋白质、肽、多核苷酸、它们的组合或者它们的衍生物。