[发明专利]转基因元件及其应用、区分雄性不育系和可育保持系的方法、扩繁玉米雄性不育系的方法

权利要求书

1.一种转基因元件，其特征在于，包括：

(Ⅰ)第一表达框，所述第一表达框含有玉米雄性不育基因的显性等位基因和所述显性等位基因的启动子；

(Ⅱ)第二表达框，所述第二表达框含有甜质基因的启动子、所述甜质基因的正向RNAi片段、所述甜质基因的反向RNAi片段。

2.根据权利要求1所述的转基因元件，其特征在于，所述玉米雄性不育基因的显性等位基因：

(i)具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

(ii)具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列75％同源性的序列；

(iii)具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经缺失、取代或添加一个或多个核苷酸获得的核苷酸序列。

3.根据权利要求1或2所述的转基因元件，其特征在于，所述玉米雄性不育基因的显性等位基因的启动子：

(i)具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；

(ii)具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列75％同源性的序列；

(iii)具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列经缺失、取代或添加一个或多个核苷酸获得的核苷酸序列。

4.根据权利要求1至3任一项所述的转基因元件，其特征在于，所述甜质基因为Bt2。

5.根据权利要求1至4任一项所述的转基因元件，其特征在于，所述甜质基因的启动子：

(i)具有如SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列；

(ii)具有如SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列75％同源性的序列；

(iii)具有如SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列经缺失、取代或添加一个或多个核苷酸获得的核苷酸序列。

6.根据权利要求1至5任一项所述的转基因元件，其特征在于，所述甜质基因的正向RNAi片段：

(i)具有如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列；

(ii)具有如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列75％同源性的序列；

(iii)具有如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列经缺失、取代或添加一个或多个核苷酸获得的核苷酸序列。

7.根据权利要求1至6任一项所述的转基因元件，其特征在于，所述甜质基因的反向RNAi片段：

(i)具有如SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列；

(ii)具有如SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列75％同源性的序列；

(iii)具有如SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列经缺失、取代或添加一个或多个核苷酸获得的核苷酸序列。

8.根据权利要求1至7任一项所述的转基因元件，其特征在于，所述第二表达框还包括所述甜质基因的内含子。

9.根据权利要求1至8任一项所述的转基因元件在玉米杂交种制种中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述玉米杂交种制种包括区分玉米杂交种母本雄性不育系和保持系或扩繁玉米杂交种母本纯合隐性雄性不育系。

11.一种区分玉米杂交种母本雄性不育系和保持系的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤a、获得第一玉米植株作为父本；

所述第一玉米植株含有一对玉米雄性不育的纯合隐性等位基因ms8ms8；

步骤b、获得第二玉米植株作为母本；

所述第二玉米植株含有玉米雄性不育的纯合隐性等位基因ms8ms8和如权利要求1至8任一项所述的转基因元件；

步骤c、取所述第一玉米植株与所述第二玉米植株杂交，获得F1代后，与所述第一玉米植株多代回交，通过籽粒皱缩性状区分不育系和保持系；

籽粒皱缩的为保持系，籽粒饱满的为不育系。

12.一种扩繁玉米杂交种母本雄性不育系的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤a、获得第一玉米植株作为父本；

所述第一玉米植株含有一对玉米雄性不育的纯合隐性等位基因ms8ms8；

步骤b、获得第二玉米植株作为母本；

所述第二玉米植株含有玉米雄性不育的纯合隐性等位基因ms8ms8和如权利要求1至8任一项所述的转基因元件；

步骤c、取所述第一玉米植株与所述第二玉米植株杂交，获得F1代后，与所述第一玉米植株多代回交，通过籽粒皱缩性状区分雄性不育系和可育保持系；籽粒皱缩的为可育保持系，籽粒饱满的为雄性不育系；

步骤d、取步骤c所述可育保持系与所述雄性不育系杂交，获得籽粒饱满的杂交种母本雄性不育系和籽粒皱缩的可育保持系；

所述籽粒饱满的杂交种母本雄性不育系与其父本杂交进行玉米杂交种的制种；

所述籽粒皱缩的可育保持系与所述雄性不育系杂交，获得雄性不育系和可育保持系。