[发明专利]一种检测硫化氢的荧光探针及其制备方法与使用方法

权利要求书

1.一种检测硫化氢的荧光探针,其特征在于：该荧光探针的结构式为式(I)；

式(I)中，n为0～18的原子数，R为甲基，或羟基，或羧基，或磺酸基，或(三苯基)磷基，或中的任何一种。

2.根据权利要求1所述一种检测硫化氢的荧光探针，其特征在于：其结构式如式(II)，

3.一种检测硫化氢的荧光探针的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

步骤一：在惰性气氛下，式(III)所示4-溴-1，8-萘二甲酸酐与氨基化合物在醇中反应得到式(IV)所示取代的4-溴-1，8-萘酰亚胺；

式(IV)中，n为0～18的原子数，R为甲基，或羟基，或羧基，或磺酸基，或(三苯基)磷基，或中的任何一种；

步骤二：在惰性气氛下，在金属钠的存在下，式(IV)所示化合物在醇中反应得到式(V)所示取代的4-羟基-1，8-萘酰亚胺；

式(V)中，n为0～18的原子数，R为甲基，或羟基，或羧基，或磺酸基，或(三苯基)磷基，或中的任何一种；

步骤三：在惰性气氛下，在碱存在下，式(V)所示化合物与式(VI)所示对叠氮苄醇反应即得式(I)所示化合物；

4.根据权利要求3所述的一种检测硫化氢的荧光探针的制备方法；其特征在于：

步骤一中所述式(III)所示4-溴-1，8-萘二甲酸酐和所述氨基化合物的摩尔比可为1～50:1；所述氨基化合物为正丁胺；所述醇可为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或乙二醇单甲醚；步骤一的反应温度为50～120度；反应时间为1～20小时；

步骤二中所述醇为叔丁醇，异丙醇；式(IV)所示4-溴-1，8-萘酰亚胺和所述金属钠的摩尔比可为0.1～1:1；步骤二的反应温度为0～100度；反应时间为1～20小时；

步骤三中所述碱与式(VI)所示对叠氮苄醇的摩尔比可为1～10:1，所述碱为有机碱或无机碱，所述有机碱为三乙胺、吡啶或二异丙基乙基胺，所述无机碱为碳酸钾、碳酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾；式(V)所示4-羟基-1，8-萘酰亚胺和式(VI)所示对叠氮苄醇的摩尔比可为1～0.1:1；步骤三的反应温度为0～100度；反应时间为1～20小时；步骤三反应过程在有机溶剂中进行，所述有机溶剂为乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或丙酮。

5.根据权利要求4所述的一种检测硫化氢的荧光探针的制备方法；其特征在于：

步骤一中，反应温度为80度；反应时间为5小时；，4-溴-1，8-萘二甲酸酐和所述氨基化合物的摩尔比为10：1；

步骤二中，反应温度为60度，反应时间为8小时，醇为叔丁醇；4-溴-1，8-萘酰亚胺和金属钠的摩尔比为1.5：1；

步骤三中，反应温度为80度，反应时间为10小时，式(V)所示4-羟基-1，8-萘酰亚胺和式(VI)所示对叠氮苄醇的摩尔比为0.8：1；碱与式(VI)所示对叠氮苄醇的摩尔比为2.2：1，有机溶剂为乙腈。

6.一种检测硫化氢的荧光探针的使用方法；其特征在于：

步骤1：向不同浓度硫化氢的缓冲溶液中加入相同浓度的式(I)所示化合物，配置至少3种不同硫化氢含量的含有式(I)所示化合物的标准溶液；

所示缓冲溶液可以是磷酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液、HEPES缓冲溶液或硼酸-硼酸钠缓冲溶液；

所示标准溶液的pH值为5～11；

所示标准溶液中式(I)所示化合物的浓度为1nM～1μM；

所示标准溶液中硫化氢的含量为0.1nM～1mM；

步骤2：分别测定所述标准溶液的荧光发射光谱，激发波长为410nm，以硫化氢浓度为横坐标，以I₅₃₉/I₄₄₄或I₄₄₄/I₅₃₉为纵坐标，建立标准曲线；

I₅₃₉表示所述标准溶液在波长为539nm处的荧光发射峰强度值；

I₄₄₄表示所述标准溶液在波长为444nm处的荧光发射峰强度值；

步骤3：向待测样品中加入式(I)所示化合物，控制其浓度与所述标准溶液中式(I)所示化合物的浓度相等；测定其在激发波长为410nm的激发光下的荧光发射谱，即可根据标准曲线计算得出待测样品的硫化氢含量。