[发明专利]红芪乙醇提取物在制备预防和治疗肝纤维化药物中的应用及其中有效成分鉴定方法

说明书

本发明提供红芪乙醇提取物在制备预防和治疗肝纤维化药物中的应用及其中有效成分鉴定方法。本发明首次探讨了红芪乙醇提取物对四氯化碳所致小鼠肝纤维化的防治作用，并选择10批不同产地红芪研究其抗肝纤维化药效，在大量样本的基础上，进一步验证了红芪乙醇提取部位的药效；运用高效液相色谱（HPLC）—二极管阵列检测器（DAD）鉴定了其中主要成分，通过对一系列色谱条件的优化，得到分离度良好，峰形较佳的指纹图谱，鉴定出腺苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素及美迪紫檀素5个成分，为研究红芪乙醇提取物中发挥主要作用的成分奠定了基础。

技术领域

本发明属于中药提取技术领域，具体涉及红芪乙醇提取物在制备预防和治疗肝纤维化药物中的应用及其中有效成分鉴定方法。

背景技术

红芪(Radix Hedysari)也称为 “独根” ,是豆科植物多序岩黄芪(Hedysarumpolybotrys Hand.-Mazz.)的干燥根。红芪性微温、味甘，归肺、脾经。具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血等功效。其化学成分主要有多糖、黄酮、皂苷、微量元素及氨基酸。

肝纤维化为一病理组织学概念，是多种慢性肝病共有的病理改变，肝纤维化是由于多种损肝因素引起肝脏星状细胞 (HSC)的激活，细胞外基质(ECM)过多生长而致细胞转化生长因子1(TGF- 1) TNF等促胶原降解减少而大量堆积所致，它持续发展的中心环节在于肝细胞损伤或坏死对周围非实质细胞的不断刺激，从而导致ECM大量合成与沉积，超过其降解速度，由此造成肝细胞结构的改建与破坏，并逐渐演变成肝硬化。肝纤维化是一种主动进展的、可逆的基质代谢失衡和肝脏结缔组织重构的过程，由肝炎病毒、酒精、药物与毒物、血吸虫、代谢和遗传、胆汁淤积、自身免疫性肝病等各种损伤因素长期慢性刺激肝脏引起炎症而形成的。为大多数慢性肝病所共有的病理特征，也是慢性肝炎、肝硬化进一步发展、恶化的重要中间环节。研究表明，肝纤维化患者中的20%-40%最终发展为肝硬化乃至肝癌。20世纪50年代，国际肝病学术权威Hans Popper教授首先提出“谁能阻止肝纤维化，谁就能治愈大多数肝病”，因此有效地阻断肝纤维化的发生发展，对防治肝硬化肝癌具有重要意义。

单味中药及有效单体治疗肝纤维化亦取得了一定进展，报道较多具有抗肝纤维化作用的单味药主要有黄芪、桃仁、红花、三七、丹参、赤芍、汉防己、川芎、冬虫夏草、当归、苦参等几十余种，对肝纤维化均具有较好的防治作用，但大部分并未深入研究发挥疗效的药物所含化学成分。本发明通过研究10批不同产地红芪，发现其乙醇提取物对肝纤维化有良好效果，同时鉴定了其中5种化学成分，为进一步研究其发挥药效的物质奠定了基础。

发明内容

本发明提供了红芪乙醇提取物在制备预防和治疗肝纤维化药物中的应用，并对其中发挥药效的主要化学成分进行了鉴定。

本发明首先提供红芪乙醇提取物在制备预防和治疗肝纤维化药物中的应用。

优选地，所述红芪乙醇提取物的有效成分包括腺苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素和美迪紫檀素。

优选地，所述红芪乙醇提取物的制备方法为：用2-10倍量的95%-50%乙醇回流提取3次，每次1h，合并提取液，减压回收至无乙醇味，将残留液依次用与残留液体积相等的石油醚和乙酸乙酯萃取5次后，将下层溶液浓缩至干，加入95%-50%乙醇，能溶于其中的即为红芪乙醇提取物。

本发明还提供红芪乙醇提取物的制备方法，步骤如下：用2-10倍量的95%-50%乙醇回流提取3次，每次1h，合并提取液，减压回收至无乙醇味，将残留液依次用与残留液体积相等的石油醚和乙酸乙酯萃取5次后，将下层溶液浓缩至干，加入95%-50%乙醇，能溶于其中的即为红芪乙醇提取物。