[发明专利]楸树组培苗生根培养方法

说明书

技术领域

本发明属于植物培植领域，涉及一种植物组织培养的方法，具体涉及一种楸树组培苗生根培养方法。

背景技术

楸树(Catalpa bungei C.A.Meyer)，属紫葳科，梓树属，为落叶乔木，在立地较好的条件下，树高可达30m，胸径达1m以上。但是在繁殖方面，由于楸树雌雄花期不遇，往往自花不育，需人工授粉才能结实，结实出种率很低，种子发芽率不高，实生繁殖较为困难，造成楸树资源相对较少。目前多采用根蘖或嫁接方法生产楸树种苗。随着对楸树采伐利用增多，常规的繁殖不能满足生产对良种苗木的需要，致使出现成材比例严重失调和楸木供不应求的局面，与当前快速发展林业的形势不相适应。探索快繁繁殖楸树的方法来促进和改善楸树繁育和苗木培育状况成为亟待解决的问题。

组织培养是迅速繁殖林木的方法之一，如孟永红等，在《河北林果研究》、报道的“楸树植株再生体系的建立”中，筛选出了楸树不定芽生长及分化的培养基为MS+6－BA 0.8mg/L+IBA 0.1mg/L，其最高增殖系数为5。

韩创举等，在《西北林学院学报》报道的“楸树组培技术研究”中，对楸树组培研究表明N6+6－BA 1.5mg/L+NAA 0.0016mg/L是楸树的最佳增殖培养基，最高增殖系数为7.2，该配方基本培养基为N6。

傅玉兰等在《技术开发》报道的“楸树试管丛生芽继代增殖影响因素的研究”中，公开了楸树丛生芽继代增殖最适宜培养基配方是MS+BA 4.0mg/L+IBA 0.5mg/L+PVP 100mg/L+食糖30g/L，最高增殖系数为4.8，且培养周期为35天。

以上关于楸树增殖培养基的研究中，激素配比以细胞分裂素与生长素的组合为主，且研究多停留在理论层面，且组培生根苗需要经过炼苗后才能进行大棚移栽，在工厂化生产过程中，该步骤耗费人工成本大，降低炼苗成本是楸树组培产业化生产又一待解决的难题。

中国发明专利申请CN104054580 A公开了“一种提高楸树增殖系数的组织培养方法”，包括以下步骤(1)无菌培养物的建立；(2)腋芽的诱导；(3)腋芽的增殖；(4)芽苗的生根培养；(5)炼苗与移栽，五个步骤，该专利申请最佳腋芽诱导配方为MS+BA 0.8mg/L+IBA 0.1mg/L；最佳腋芽增殖配方为MS+BA1.5mg/L+ZT O.1mg/L+IAA 0.2mg/L；最高增殖系数为15，该方法虽然获得较高的增殖系数，但其增殖主要通过腋芽诱导和腋芽增殖两步实现，若进行工厂化生产，该方法步骤繁琐，人工成本大，不利于大规模的工厂化生产。

在楸树工厂化生产过程中，不仅要保证扩繁比例，还需确保可用于生根种苗比例，而现有文件报道大都仅限于理论水平，生根材料需要从扩繁苗中筛选，可用于生根种苗比例极低，难以满足产业化生产要求。

因此，建立一种操作过程简单，周期短，增殖系数稳定，成本低，扩繁比例和可用于生根种苗比例均符合楸树组培产业化生产即能在短期内为生产提供大量正常健康的楸树无菌组培苗方法具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题，是提供一种楸树组培苗生根培养的方法，该培养方法所得增殖系数稳定，周期短，操作过程简单，能有效降低人工成本，利于大规模的工厂化生产。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

一种楸树组培苗生根培养方法，它按照以下步骤顺序进行：

(1)楸树无菌苗的获取

选取带芽点的健壮枝条于室内进行水培，待新芽萌发出来后切割成2～3cm长的顶芽或带腋芽的茎段，剪去叶片留3～5mm叶柄，用75％酒精擦拭外植体表面， 用洗衣粉水浸泡2min，再置于流水下冲洗0.5～1h；在超净工作台上，用0.05％的升汞处理6～9min，用无菌水冲洗5次，接种至培养基A中，每瓶接种2株，获得楸树无菌苗；

(2)无菌苗的继代

选取生长周期为26～30天，生长健壮、叶片浓绿的楸树无菌苗，利用顶芽、茎段及基部丛生芽进行繁殖，其中顶芽高0.8～1.4cm、茎段高0.5～1cm，至少含一个腋芽，基部愈伤组织含2～4个小芽，继续转接至培养基A中，培养26～30天后，即可得用于生根的楸树组培苗进行生根培养或者用于继续继代的楸树组培苗；

(3)楸树组培苗生根培养