[发明专利]诱导脂肪干细胞分化为表皮细胞的方法在审
| 申请号： | 201510070099.7 | 申请日： | 2015-02-10 |
| 公开（公告）号： | CN104611290A | 公开（公告）日： | 2015-05-13 |
| 发明（设计）人： | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;马岩岩;王小燕 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 诱导 脂肪 干细胞 化为 表皮 细胞 方法 | ||
1.一种诱导脂肪干细胞分化为表皮细胞的方法，其特征在于，将脂肪干细胞于EGF、bFGF、ATRA和IGF-1存在条件下诱导培养，得到表皮细胞。
2.根据权利要求1提供的方法，其特征在于，所述诱导培养的培养基为含有5wt％FBS的DMEM/F12培养基。
3.根据权利要求1提供的方法，其特征在于，所述EGF的浓度为15～25ng/mL；bFGF的浓度为3～7ng/mL；ATRA的浓度为3～7μmol/L；IGF-1的浓度为3～7ng/mL。
4.根据权利要求1提供的方法，其特征在于，所述诱导培养的培养基中还包括地塞米松。
5.根据权利要求1提供的方法，其特征在于，所述地塞米松的浓度为0.01～0.2μmol/L。
6.根据权利要求1提供的方法，其特征在于，所述诱导培养的时间为7d，温度为37℃，CO2体积分数5％，饱和湿度。
7.根据权利要求1提供的方法，其特征在于，所述脂肪干细胞在诱导培养前经胰蛋白酶消化、融合，具体为：取第三代～第五代的脂肪干细胞，加入质量分数为0.25％胰蛋白酶和质量分数为0.02％EDTA进行消化，以血清终止消化后1200r/min离心5min，以DMEM/F12培养基重悬细胞，调整密度为1×104/mL，培养至40％～50％融合。
8.根据权利要求1～7任一项提供的方法，其特征在于，所述诱导培养后，还包括扩增培养、传代的步骤。
9.根据权利要求1提供的方法，其特征在于，所述扩增培养、传代的培养基为表皮细胞无血清培养基SFM。
10.根据权利要求1提供的方法，其特征在于，所述扩增培养、传代的条件为温度为37℃，CO2体积分数5％，饱和湿度95％。
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