[发明专利]一种基于普鲁兰多糖的负载药物和基因的载体、及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于普鲁兰多糖的用于负载药物或/和基因的载体，其特征在于：所述的载体以硬脂酸为疏水核心，以普鲁兰多糖和低分子量聚乙烯亚胺为亲水外壳，该载体具有式Ⅰ或式Ⅱ的结构：

式Ⅰ中，m为5到24之间的整数，n为11到47之间的整数；式Ⅱ中，n为9到45之间的整数。

2.根据权利要求1所述的载体，其特征在于，所述的低分子量聚乙烯亚胺为支链型聚乙烯亚胺。

3.根据权利要求1所述的载体，其特征在于：所述的低分子量聚乙烯亚胺的重均分子量为500-2000Da，所述的普鲁兰多糖的平均分子量为30-200kDa，所述的硬脂酸接枝率为3-10％，所述的低分子量聚乙烯亚胺接枝率以含氮量表示：为5-12％。

4.如权利要求1-3的任一项所述的载体的制备方法，其特征在于，所述载体是将硬脂酸和低分子量聚乙烯亚胺分别通过酯化反应和酰胺化反应依次接枝到普鲁兰多糖的骨架上而制备得到的。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(1)氮气保护下，普鲁兰多糖中加入硬脂酸和4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸，在15-50℃下搅拌反应30-70h，收集产物，产物经透析纯化、冷冻干燥，得到普鲁兰-硬脂酸接枝聚合物；反应溶剂为二甲基亚砜；

(2)氮气保护下，步骤(1)得到的普鲁兰-硬脂酸接枝聚合物中加入琥珀酸酐和4-二甲氨基吡啶，在30-70℃下搅拌反应5-30h，收集产物，产物经透析纯化、冷冻干燥，得到普鲁兰-硬脂酸-琥珀酸酐接枝聚合物；反应溶剂为二甲基亚砜；

(3)氮气保护下，步骤(2)得到的普鲁兰-硬脂酸-琥珀酸酐接枝聚合物中，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺，在2-8℃下搅拌活化2-8h，再加入低分子量聚乙烯亚胺，在15-50℃下搅拌反应10-30h，经透析纯化、冷冻干燥，得到普鲁兰-硬脂酸-聚乙烯亚胺接枝聚合物；反应溶剂为磷酸盐缓冲液；

其中：

步骤(1)中所述的普鲁兰多糖和硬脂酸的摩尔比为(1-5)：1-30：1，硬脂酸、4-二甲氨基吡啶和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的摩尔比为1：(0.5-2)：(1-2.5)；

步骤(2)中所述的普鲁兰-硬脂酸接枝聚合物和琥珀酸酐的摩尔比为1：(1-3)，4-二甲氨基吡啶与琥珀酸酐的摩尔比为1：(4-12)。

步骤(3)中所述的普鲁兰-硬脂酸-琥珀酸酐接枝聚合物中羧基与支链型聚乙烯亚胺中氨基的摩尔比为1：(0.1-5)，普鲁兰-硬脂酸-琥珀酸酐接枝聚合物中羧基、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1：(0.1-3)：(0.1-3)。

6.一种药物-基因-载体系统，包括载体和负载在所述载体上的疏水性抗癌药物和基因物质，其中所述的载体为权利要求1-3的任一项所述的载体。

7.根据权利要求6所述的药物-基因-载体系统，其特征在于，所述的疏水性抗癌药物为阿霉素、紫杉醇、喜树碱中的一种。

8.根据权利要求6所述的药物-基因-载体系统，其特征在于，所述的基因物质为质粒DNA、染色体DNA、线粒体DNA中的一种。

9.根据权利要求6所述的药物-基因-载体系统，其特征在于，所述的质粒DNA为pβGal、p53中的一种。

10.权利要求6-9的任一项所述的药物-基因-载体系统的制备方法，包括如下步骤：

(1)将载体和疏水性药物搅拌混合，经透析、冷冻干燥后得载体负载药物系统；

(2)将所述载体负载药物系统与基因物质混合后室温孵育，得到药物-基因-载体系统；

其中，疏水性药物与载体的质量比为1：(5-30)；负载药物系统与基因物质的质量比为(0.01-80)：1；所述孵育时间为20-60min。