[发明专利]一种利用甜高粱同步生产秸秆纳米纤维素和细菌纤维素的方法在审
申请号: | 201510066078.8 | 申请日: | 2015-02-09 |
公开(公告)号: | CN104630311A | 公开(公告)日: | 2015-05-20 |
发明(设计)人: | 唐波;刘文玉 | 申请(专利权)人: | 江苏联海生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P19/04 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 226100 江苏省南*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 高粱 同步 生产 秸秆 纳米 纤维素 细菌 方法 | ||
1.一种利用甜高粱同步生产秸秆纳米纤维素和细菌纤维素的方法,其特征在于,包括如下步骤:
a、对甜高粱秸秆进行轧制处理,得到甜高粱汁液和秸秆渣;
b、将所述秸秆渣在2~6MPa的压力下进行蒸汽闪爆处理,控制闪爆过程时间小于0.1s,得到汽爆秸秆和汽爆秸秆液;
c、将所述汽爆秸秆进行水洗,收集水洗液后经过过滤后,与所述甜高粱汁液、汽爆秸秆液合并,得到混合秸秆液;
d、在水洗后的汽爆秸秆中加水,依次由漆酶、木聚糖酶和纤维素酶酶解,将酶解物经过过滤后先进行水洗,再进行过滤,得到酶解秸秆纤维,同时将水洗液和所述混合秸秆液合并,得到木醋杆菌发酵原糖液;
e、在所述酶解秸秆纤维中加水,制成酶解秸秆纤维悬浮液,经过50~150MPa的压力下均质,制成纳米纤维素水溶液;然后边搅拌,边向所述纳米纤维素水溶液中加入醋酸进行酸化后,加入壳聚糖,搅拌溶解并与所述纳米纤维素充分混合均匀,将混合液超声震荡后,在40~50℃真空干燥成膜,将得到的膜浸泡在碱液中5~10 min后取出,水洗至中性,烘干,制得到壳聚糖-纳米纤维素混合膜;
f、将所述丁醇发酵原糖液用自来水调整糖分,使得糖的含量在6~8wt%,再添加酵母粉、蛋白胨、柠檬酸、磷酸氢二钠、硫酸镁、羟甲基壳聚糖,调至pH为5.5~6.5,在121℃下灭菌20 min,制成木醋杆菌发酵培养基,接种木醋杆菌发酵种子液后进行发酵,得到细菌纤维素膜;
g、培养结束后,取出细菌纤维素膜,用蒸馏水冲洗2~4次后,浸入到0.1~0.2 mol/L的NaOH溶液中,60~90℃保温40~100 min,除去膜中的菌体和培养基,再用蒸馏水冲洗2~4次后至中性, 60~80℃烘干至恒重,制得羟甲基壳聚糖改性的细菌纤维素。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤c中所述水洗时加入的水量为汽爆秸秆重量的0.5~2倍。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤d所述的漆酶酶活5万U/g ,添加量60~80 U/g底物,反应温度50~70℃,酶解4~6 h;木聚糖酶酶活5万U/g,添加量20~30 U/g底物,反应温度30~50℃,酶解2~4 h;纤维素酶酶活为20万U/g,添加量为100~300 IU/g底物,反应温度40~60℃,酶解8~12 h。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤f中,所述酵母粉、蛋白胨、柠檬酸、磷酸氢二钠、硫酸镁的加量分别为丁醇发酵原糖液重量的0.4~0.7%、0.4~0.6%、0.1~0.2%、0.2~0.3%、0.4~0.6%。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤f中的木醋杆菌发酵温度为28~33℃,菌株的接种量为6~10%,发酵时间5~8 天。
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